¿QUÉ ES LA TINCIÓN?

¿QUÉ ES LA TINCIÓN?

1. Se le llama tinción a una técnica que se emplea en los laboratorios con el objetivo de optimizar la visión de aquello que se observa a través de un microscopio. La tinción, de este modo, consiste en aplicar un colorante a una sustancia o un tejido para que resulte más simple detectarlo y analizarlo.

   • Hablaremos de dos tinciones utilizadas en el Laboratorio de Microbiologia
     • TINCIÓN DE GRAM
       • En esta tinción la clave está en que el microorganismo sea capaz de retener o no el tinte o colorante. Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve, se tiñen de una forma u otra. Así, las bacterias que no se tiñen mediante esta técnica se denominan Gram negativas. Están formadas por una pared más fina formada por menos capas de peptidoglicano y una segunda membrana rica en lípidos (que repele la tinción Gram), al microscopio aparecen incoloras.
         • PROCEDIMIENTO
           • Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo (bastón estéril de algodón)
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             • Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar
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               • Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol)
                 • Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un minuto.
                   • Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol). El lugol y el violeta de genciana forman un complejo insoluble en agua capaz de penetrar en la pared de las células bacterianas.
                     • Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos segundos.
                       • Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina para distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lavar con agua.
                         • Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de color violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas.
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       • Esta técnica fue desarrollada por el doctor Christian Gram en 1884.
     • TINCIÓN DE ZIEHL NEELSEN
       • El nombre de este procedimiento de microbiología hace referencia a sus autores: el bacteriólogo Franz Ziehl y el patólogo Friedrich Neelsen.
       • Es una coloración diferencial útil para detectar bacterias acido-alcohol resistentes entre ellas, la identificación de micobacterias, aunque no permite la diferenciación de distintas especies. La característica de ácido-resistencia de estos microorganismos hace de esta coloración un método rápido en el diagnóstico, presuntivo, de infección micobacteriana. Las micobacterias son coloreadas de rojo por la Fucsina y retienen el color a pesar de la acción del ácido y del alcohol.
         • PROCEDIMIENTO
           • Tomar una cantidad homogénea de esputo y extenderla de un extremo a otro del portaobjetos para lograr una película homogénea
             • Cubir el extendido con fucsina filtrada
               • Calentar(mechero) hasta emisión de vapores tres veces durante 5 minutos
                 • Lavar con agua destilada y luego cubrir con solución decolorante(alcohol ácido) durante 3 minutos
                   • Lavar con agua destilada y luego cubrirlo con Azul de Metileno durante 1 minuto
                     • Volvemos a lavar con agua destilada y secar al aire
                       • Observación microscópio: Bacilos ácido-alcohol resistentes: Rojo- Eritrocitos: Amarillo anaranjado-Otros elementos tisulares: Azul
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