TINCION PARA CROMATINA SEXUAL

TINCION PARA CROMATINA SEXUAL

1. Fucsina

   • Es uno de los colorante nucleares mas energeticos, Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma
     • 1. Aplica Fucsina durante 10 minutos
     • 2. Se lava y escurre.
     • 3. Se decolora en alcohol al 70% 10 minutos
     • 4. Se lava y escurre.
   • Robert Feulgen, en 1914, describió un método para revelar por tinción el ADN, basado en el colorante fucsina

2. Aceto-Orceina

   • Tiene afinidad por el ADN ya que se une a la carga negativa del fosfato
     • 1. Se realiza la fijación por calor
     • Con esta técnica de tinción se ven los cromosomas impregnados por la orcina en color morado y el resto de las estructuras celulares de otro color.
     • 2. Se aplica Orceina durante 5 minutos
     • 3. Se lava y escurre

3. Giemsa

   • Permite observar y diferenciar el núcleo y el citoplasma, estos se tiñen de forma homogénea y distinta cada uno, se pueden agrupar según su forma
     • 1.Se aplica Giemsa y encima Bufer durante 30 minutos
     • 2. Lavar y secar
   • ideada por el alemán Gustav Giemsa, los mejores resultados se obtienen en muestras fijadas con formol

4. WRIGHT

   • El frotis sanguíneo una vez seco, se somete a un proceso de fijación y posteriormente a una tinción mediante un colorante adecuado
   • los ácidos nucleicos se tiñen con azul B que es el básico y la hemoglobina con la eosina Y que es ácida
     • 1. Cubrir toda la superficie con wright 2-3 minutos
     • 2. Agregar amortiguador (pH 6.4) s. La cantidad de buffer debe ser suficiente para cubrir la lámina completamente. (2.5 ml para láminas)
     • 3. oplar suavemente el extendido para mezclar hasta obtener una película uniforme de apariencia metálica - verdosa. Esperar 7 minutos
     • 4.El lavado debe ser rápido (5 - 30 segundos) para evitar precipitación del colorante sobre la superficie del extendido. dejar secar al aire

5. CAMILO A. Bautista R. 16171050