Zusammenfassung der Ressource
Deshidratación: reactivos
ysustancias alternativas
- Durante la deshidratación rápida, el agua del tejido es reemplazada rápidamente, sin el daño por tensión superficial que
puede ir asociado con los alcoholes o la acetona. El metil celosolve y dimetoxipropano tienen regiones hidrofílicas e
hidrofóbicas. Esto permite que el solvente interactúe con los lípidos de las membranas biológicas, sin causar alteración
- .La deshidratación resultante es vía un mecanismo de flujo en masa en vez de una reacción química.
Estos solventes pueden hidrolizar el agua para formar etanol y acetna, sin embargo, la energía y
condiciones requeridas para esta reacción no son normales en las condiciones de fijación y no son
consistentes con la preservación de tejidos
- . El más común es el reemplazamiento
gradual de agua con un solvente
orgánico por transferencia del tejido a
través de soluciones de concentraciones
crecientes (etanol, acetona)-referido
como una serie de deshidratación
graduada
- La deshidratación resultante es vía un
mecanismo de flujo en masa en vez
de una reacción química. Estos
solventes pueden hidrolizar el agua
para formar etanol y acetna, sin
embargo, la energía y condiciones
requeridas para esta reacción no son
normales en las condiciones de
fijación y no son consistentes con la
preservación de tejidos
- Un método menos común en
microscopía de campo claro es
una deshidratación rápida
utilizando un reactivo orgánico
(metil celosolve,
dimetoxipropano, trietil fosfato).
- Durante la deshidratación rápida, el agua del
tejido es reemplazada rápidamente, sin el
daño por tensión superficial que puede ir
asociado con los alcoholes o la acetona. El
metil celosolve y dimetoxipropano tienen
regiones hidrofílicas e hidrofóbicas. Esto
permite que el solvente interactúe con los
lípidos de las membranas biológicas, sin
causar alteración
- La mayoría de los solventes de deshidratación no
son también solventes de parafina; por tanto
incorporaremos varios pasos de intermediarios para
mover el tejido del agente deshidratante hasta la
parafina. Ejemplos de agentes intermedios son
Histo-Clear, xileno, isopropanol, y tert-butil alcolhol
(TBA).
- El isopropanol es preferido cuando se usa la
técnica de micro ondas. El huso de
Histo-Clear extraerá un fino pegamento
amarillo que atrapará y destruirá las
muestras de tejidos. A 58ºC la extracción
puede ocurrir dentro de una semana.
Cuando infiltramos en plástico, no se
requiere un solvente intermediario
- Es importante tener presente que los
pasos de la solución de deshidratación e
infiltración son solventes orgánicos. Por
tanto, cuando etiquetes las muestras de
tejidos usa pequeñas etiquetas de papel
escritos con lápiz y no con boli. Pon la
etiqueta en el vial con la muestra de
tejido. Los solventes orgánicos
disolverán el pegamento que está sobre
la etiqueta del vial y la tinta que usaste
mara marcar la etiqueta.