Determinación de fosfato en extractos lipídicos

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Determinación de fosfato en extractos lipídicos
  1. Muestras
    1. Mezclas HT y ST
      1. Hacer diluciones 1:10
      2. Mezclas HH y SH
        1. Hacer diluciones 1:10
      3. Curva Estandar
        1. Tomar alicuotas de 10 a 100 uL
          1. Fosfato diacido de Potasio 0.8 mM
            1. Diluir hasta un volumen final de 100 uL
              1. Agua MiliQ
                1. 50 uL de Nitrato de Mg al 10%
                  1. en etanol al 95%
                    1. Calentar a sequedad
                      1. 300 uL HCl 1N
                        1. Incubar
                          1. 37°C 15 min
                            1. 700 uL mezcla Ac. Ascorbico 10% - Molibdato de Amonio
                              1. Proporción 1:6
                                1. Incubar
                                  1. 37°C 1 hora
                                    1. Leer en el espectrofotómetro a 820 nm
                          2. Tomar alicuotas de 20 a 40 uL
                            1. Tomar alicuotas de 10 a 50 uL
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