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Inicio

Sellar con cinta adhesiva un molde de plastico limpio y seco.

Colocar el peine adecuado para formar pocillos completos.

Diluir el tampón TBE 50x a 0.5x

Preparar la cantidad adecuada de TBE 0.5x para llenar la cubeta de electroforesis y preparar el gel.

Pesar la agarosa en polvo para obtener la concentración requerida (0.8 - 1 % para DNA genómico).

A

A

Añadir la agarosa en una cantidad de TBE 0.5x. en un matraz Erlenmeyer.

Calentar la mezcla en un plato caliente hasta que se disuelva la agarosa

Comprobar el volumen de la disolución una vez disuleto.

B

B

Verter la soln. en el molde y dejar que se forme el gel de un grosor aprox. 3-5 mm.

Retirar cuidadosamente el peine y la cinta adhesiva

Colocar el gel en la cubeta de electroforésis.

Añadir buffer TBE 0.5x a la unidad de electroforesis de modo que el gel quede cubierto.

Preparar la muestra agregando 3 uL del buffer de cargga y 7 uL de la muestra.

C

C

Cargar uL de cada muestra en pocllos consecutivos y el ADN marcador en el primer y último pocillo.

Cerrar la tapa de la cubeta del gel.

Conectar los cables eléctricos y aplicar una tensión de 5 - 10 V/cm.

Hacer la electroforesis hasta que el cianol de xileno haya recorrido la distancia

adecuada.

Desconectar la corriente y retirar los cables y la tapa de la cubeta,

Enfriar la mezcla hasta 50 - 60 ° C.

Introducir el

gel en un transiluminador UV (320 nm) y fotografiarlo

Tirar el gel en el recipiente para residuos sólidos destinado al bromuro de etidio

Fin