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SEPARAÇÃO DOS PIGMENTOS DO ESPINAFRE

15 G DE ESPINAFRE PICADO

5 ML DE ACETONA FRIA

10 ML DE HEXANO

EM UM ALMOFARIZ PRENSE OS MATERIAS COM O PISTILO

TUBO DE CENTRIFUGAÇÃO (CENTRIFUGUE POR 2 MINUTOS)

REMOVA A CAMADA AQUOSA (INFERIOR)

ADICIONE 5 G DE SULFATO DE SÓDIO ANIDRO EM PÓ (CENTRIFUGUE POR 2 MINUTOS

DECANTE O LÍQUIDO EM UM BÉQUER

8-10 CM DE HAXANO

28 A 30 G DE SACAROSE

COLUNA CROMATOGRÁFICA

RESERVE 5 FRASCOS IDENTIFICADOS COMO: SOLVENTE, FRAÇÃO AMARELA, SOLVENTE, FRAÇÃO VERDE, SOLVENTE.

5 A 6 ML DO EXTRATO NO TOPO DA COLUNA (SEM PERTURBAR A SUPERFICIE ADSORVENTE)

5 ML DE HEXANO (DRENE ATÉ QUE A SOLUÇÃO FIQUE 3 A 5 MM ACIMA DO AÇUCAR)

HEXANO NO TOPO, TORNEIRA LIGEIRAMENTE ABERTA E RECOLHA A FRAÇÃO INCOLOR NO FRASCO 1

MAIS HEXANO ATÉ A FRAÇÃO AMARELA PASSAR A COLUNA (FRASCO 2)

COLETE O FRASCO 3

FRASCO 4 (CASO A FAIXA FIQUE RETIDA , ESCOA O ELUENTE ATÉ 0,3 - 0,5 MM ACIMA DA FASE ESTAC.) COLOQUE APROXIMADAMENTE 10 ML DE ACETONA E COLETE. E POR FIM O 5.

MARQUE COM UMA LINHA 1 CM EM CADA EXTREMIDADE DA PLACA. NA LINHA DE APLICAÇÃO TRÊS PONTOS COM INTERVALO DE 1 CM, A PARTIR DE 0,5 CM DA BORDA

APLIQUE O EXTRATO BRUTO

NO SEGUNDO PONTO APLIQUE A AMOSTRA DO PRIMEIRO FRASCO E NO TERCEIRO PONTO A AMOSTRA DO SEGUNDO FRASCO

BÉQUER 250 ML

PAPEL FILTRO PARA REVESTIR

FASE MÓVEL (70% HEXANO E 30% ACETONA) QUE NÃO ULTRAPASSE A ALTURA DE 1 CM

5 MINUTOS COBERTO COM UM VIDRO RELÓGIO

CUIDADOSAMENTE POSICIONE A PLACA DENTRO DO BÉQUER

QUANDO O SOLVENTE ATINGIR A LINHA SUPERIOR OU PARAR O DESLOCAMENTO DA AMOSTRA, MARQUE A ALTURA DO SOLVENTE COM UM LÁPIS E MEXA A DISTÂNCIA PERCORRIDA PELO SOLVENTE (DM) E AS AMOSTRAS (DR)

RF = DR / DM

VANESSA BOFF - 343099