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Description
Flashcards by MARIA GABRIELA SOUTO DE HOLANDA, updated more than 1 year ago
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Created by MARIA GABRIELA SOUTO DE HOLANDA
over 2 years ago
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| Question | Answer |
| Processamento de Material Biológico (definição) | técnicas de preparação do espécimen biológico, também chamada de preparação histológica |
| Preparação A Fresco X Preparação Permanente (Perenidade) | A Fresco (Imediato): 1. processo de obtenção e observação de material vivo e com tempo de vida útil limitada. A vantagem desse método é a observação de células em uma forma e tamanho mais natural Permanente (Mediato): 1. preserva a preparação histológica o mais próximo de quando estava "vivo" e com tempo de vida útil muito longo |
| Fases Processamento Histológico | 1. Coleta 2. Fixação 3. Descalcificação (peças duras) 4. Desidratação 5. Diafanização 6. Impregnação pela Parafina 7. Inclusão Definitiva 8. Toalete do Bloco 9. Microtomia 10. Coleta dos Cortes 11. Desparafinização e Hidratação 12. Coloração 13. Desidratação, Diafanização e Montagem Final |
| Métodos de Coleta (Técnicas) | - montagem total - esmagamento - espalhamento - corte histológico - decalque - esfregaço de sangue |
| montagem total |
Image:
Planta (binary/octet-stream)
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| esmagamento | |
| espalhamento | |
| corte histológico | |
| decalque | |
| esfregaço de sangue | |
| COLETA (obter espécimen) Como funciona? | método que se utiliza de animais de laboratório e por meio da narcose, evita sofrimento e distensões anormais das peças - anestesia do animal: câmara anestésica de éter etílico (mais utilizado para pequenos mamíferos como rato) - coleta das peças anatômicas mais sensíveis à autólise através de técnicas cirúrgicas -após a coleta, o material é colocado em líquido fixativo |
| FIXAÇÃO (Características) | atua através de agentes fixadores para preservar e estabilizar os componentes celulares como in vivo - controlar parâmetros, devido em particular o tamanho da peça - técnicas: perfusão, imersão ou gotejamente. - químicos x físicos (frio e calor) |
| FIXAÇÃO (características bom fixador) | 1. penetração rápida e vigorosa 2. evitar autólise 3. coagular proteínas 4. conservar detalhes 5. endurecimento 6. impedir estruturas artificiais 7. afinidade com corante |
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FIXAÇÃO
(fixadores químicos simples)
Image:
Formol (binary/octet-stream)
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- formaldeído: formol penetra bem mas de forma lenta (6 a 24 horas) - tetróxido de ósmio, ácido acético, ácido tricloroacético, acetona |
| FIXAÇÃO (mistura fixadoras) | - BOUIN: boa penetração, tempo médio - ZENKER: técnicas de coloração - ALFAC (FAA): penetração e rapidez média |
| Desmineralização ou Descalcificação (Processo) | - retirada dos sais minerais (necessário apenas em peças duras como ossos) 1. uso de quelantes para retirar íons metálicos sem alterar a peça obs: lavar a peça antes de passar para a desidratação |
| Desidratação (Características) | - retirada da água e substituição por álcool tornando as peças resistentes, indeformáveis e maciças 1. bateria crescente de álcool etílico (50%, 70%, 80%, 90%,100%): 30 minutos cada |
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Diafanização
(Características)
Image:
Xilol (binary/octet-stream)
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- substituição do álcool pelo diafanizante, torna a peça translúcida e com alto índice de refração - míscivel ao agente desidratante e a parafina - xilol: universalmente usado (3 banhos 30min.) |
| Impregnação pela Parafina (Definição) | - processo de imersão da peça na parafina líquida afim de preparar o material para os cortes 1. impregnação feita na estufa 2. dois ou três banhos sucessivos 3. remover vestígios do agente diafanizante |
| Inclusão Definitiva (Método) | - parafina fundida é despejada nas forminhas de brigadeiro ou um "porta espécimen" com peça voltada para o fundo - repouso até a solidificação da parafina |
| Toalete do Bloco (Procedimento) | - remover os excessos de parafina através de um suporte para prender o bloco e uma espátula aquecida ou gilete |
| Microtomia (Características) | - finalidade: cortar a peça em fatias finas, com espessura de 1 a 7 μm, no micrótomo para observação no microscópio |
| Microtomia (Procedimento) | 1. navalha de aço presa ao micrótomo 2. prender o bloco e fazer uma secção 3. após várias secções, realizar micragem 4. cortes ligados uns aos outros (fita de parafina) 5. banho-maria para estiramento |
| Coleta dos Cortes (Pescaria) | - com a lâmina de vidro limpa e a ajuda de um pincel, coletar os cortes imersos na banheira - escorrer o excesso de água - secar a preparação na estufa a 37 graus para a colagem |
| Desparafinização e Hidratação dos Cortes (Processo) | - retirada da parafina: 3 banhos de xilol para remover parafina dos tecidos (banho 1: 5 minutos, banho 2: 3 minutos e banho 3: 2 minutos) - substituição paulatina de álcool por água 1. bateria decrescente de álcool etílico (100%, 95%, 90%, 80%, 70%, 50%) |
| Coloração Hematoxilina e Eosina (Características) | 1. hematoxilina: corante básico azulado (núcleo) 2. eosina: corante ácido avermelhado (citoplasma) tempo médio de coloração: 1. 45 segundos, em seguida lavagem dos cortes e mais 20 minutos para viragem do azul 2. solução eosina 1% por 2 minutos, em seguida lavagem em água destilada |
| Colorações (Tipos) | 1. PANÓPTICA: banhos sucessivos em corantes neutros 2. BASÓFILA: utilização de corantes básicos em componentes basófilos 3. METACROMÉTICA: células apresentam coloração diferente a do corante utilizado 4. ORTOCROMÁTICA: células apresentam mesma coloração do corante 5. PANCRÔMICA: corantes neutros utilizados em um único banho |
| Desidratação, Diafanização e Montagem Final (Processo) | - repetição de processos de desidratação e diafanização - Montagem final: "sanduíche" feito pela lâmina + espécimen e resina natural (responsável pela colagem) + lamínula |
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