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Description
Flashcards by Danielli Suzel, updated 6 months ago
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Created by Danielli Suzel
6 months ago
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| Question | Answer |
| Qual é a função das endonucleases ou enzimas de restrição? | Servem para crivar o material genético de interesse, são encontradas nas bactérias |
| Como funciona a metilação | É adicionado um grupo metil na citosina, para produzir 5-metil-citosina (pelas metil-transferases). |
| Pra que serve a metilação? É um processo artificial ou natural? | Serve como um silenciamento gênico e ocorre de forma natural, ele camufla o DNA e o impede de ser transcrito (porque compacta a cromatina, impedindo que a RNA-polimerase se ligue a molécula) ou degradado por nucleases |
| Qual é o nome da região onde ocorre a metilação? | Região promotora, onde temos ilhas de CpG |
| Como é formado um DNA recombinante? | A partir de um gene de interesse (isolado e clivado por uma enzima de restrição), um vetor (geralmente plasmídeo, também isolado e clivado) e uma enzima de DNA-ligase para ligar essas duas regiões (formando um DNA circular) |
| Cite o nome de 4 vetores de DNA-recombinante e o que determina a escolha entre eles | Plasmídeo, bacteriófago, fagemídeos e cosmídeos. O que os difere é somente o tamanho da área de inserção, que permite inserir diferentes quantidades de pares de bases. |
| Cite as vantagens e desvantagens de usar plasmídeo como vetor. | As vantagens são que devido ao seu tamanho ele é mais fácil de ser manipulado, mais estável devido ao seu formato circular, tem um número de cópias alto e é de fácil detecção devido a genes resistentes a antibióticos. A desvantagem é que fragmentos grandes não podem ser clonados e a faixa de tamanho é de 0 a 10kb. |
| Qual é a vantagem de usar vetores de fagos? | Mais eficientes que plasmídeo para clonar inserções grandes |
| Explique o ciclo lítico | após injetarem o DNA viral na bactéria, haverá replicação do DNA viral e produção de proteínas virais que formarão novos bacteriófagos, que causam a lise da célula para se libertarem. |
| Explique o ciclo lisogênico | o DNA viral após ser injetado dentro da bactéria, vai se integrar ao DNA bacteriano e ser replicado juntamente quando a bactéria se reproduzir, passando o DNA do bacteriófago para a sua descendência |
| Quais são as etapas da clonagem molecular? | 1. Isolar o gene de interesse e abrir o plasmídeo 2. Ligar o gene no plasmídeo com a DNA ligase |
| Quais são os tipos de corte enzimático e o que os diferencia? | Abrupta (no eixo de simetria) ou coesivas (ao redor do eixo de simetria) |
| Como é dada a nomenclatura das enzimas? | Gênero, espécie, estirpe e ordem cronológica. Exemplo: EcoRI E: escherichia / co: coli / R: RY 13 / I: primeira enzima descoberta nessa espécie |
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