13901374
Description
Mind Map by Eduardo de Mucha, updated more than 1 year ago
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Created by Eduardo de Mucha
almost 6 years ago
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Métodos de Secuenciación del ADN
- Sanger
- Uso de dideoxinucleótidos sin
la terminal 3' para generar
fragmentos pequeños debido
a que la DNA pol no puede
terminar su secuenciación sin
ese fragmento terminal
- Uso de dideoxinucleótidos sin
la terminal 3' para generar
fragmentos pequeños debido
a que la DNA pol no puede
terminar su secuenciación sin
ese fragmento terminal
- Maxam y Gilbert
- Fragmentos marcado
radioactivamente que son
escindidos posteriormente y
se leen gracias a su
radioactividad
- Fragmentos marcado
radioactivamente que son
escindidos posteriormente y
se leen gracias a su
radioactividad
- Priosecuenciación
- Se basa en la detección de la señal
luminosa generada por una reacción
quimioluminiscente, en la cual es
utilizada como sustrato, el pirofosfato
que se libera como resultado de la
incorporación de un nucleótido a la
cadena de ADN naciente.
- Se basa en la detección de la señal
luminosa generada por una reacción
quimioluminiscente, en la cual es
utilizada como sustrato, el pirofosfato
que se libera como resultado de la
incorporación de un nucleótido a la
cadena de ADN naciente.
- SOLiD
- Se basa en usar fragmentos de
DNA de una biblioteca en
donde se clonan estos
fragmentos con emulsión de
PCR donde después se juntan
con una ligasa, primers y
sondas con fluorescencia,
estos se hibridizan y se leen
- Se basa en usar fragmentos de
DNA de una biblioteca en
donde se clonan estos
fragmentos con emulsión de
PCR donde después se juntan
con una ligasa, primers y
sondas con fluorescencia,
estos se hibridizan y se leen
- Ion torrent
- Se usa un chip semiconductor con muchos pozos en
donde se va a depositar perlas con fragmentos de DNA
replicado y se van a llenar los pozos en este chip con
uno de los 4 nucleótidos del DNA y al unirse estos a los
fragmentos de las perlas, se liberará un ión hidrógeno
y se lee este cambio de pH
- Se usa un chip semiconductor con muchos pozos en
donde se va a depositar perlas con fragmentos de DNA
replicado y se van a llenar los pozos en este chip con
uno de los 4 nucleótidos del DNA y al unirse estos a los
fragmentos de las perlas, se liberará un ión hidrógeno
y se lee este cambio de pH
- Illumina -Solexa
- Se unen adaptadores a los extremos de la muestra y
esta se coloca en un portaobjetos con carriles con 2
diferentes oligonucleótidos que van a formar
cadenas y luego puentes entre si entre más se
replican, este proceso se le llama "cluster
generation". Se eliminan las cadenas en reversa y se
secuencia esto con nucleótidos con fluorócromos
que serán leídos.
- Se unen adaptadores a los extremos de la muestra y
esta se coloca en un portaobjetos con carriles con 2
diferentes oligonucleótidos que van a formar
cadenas y luego puentes entre si entre más se
replican, este proceso se le llama "cluster
generation". Se eliminan las cadenas en reversa y se
secuencia esto con nucleótidos con fluorócromos
que serán leídos.
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