TÉCNICAS DE INMUNODIAGNÓSTICO

TÉCNICAS DE INMUNODIAGNÓSTICO

1. ELISA (ENZYME-LINKED INMUNOSORBENT ASSAY)

   • 1. Fundamentos Interacción específica entre antígeno y anticuerpo. Los anticuerpos están unidos a una enzima reportera que, al reaccionar con un sustrato cromogénico, genera un cambio de color, se realiza en placas de microtitulación que permiten analizar varias muestras a la vez. 2. Usos Detección de enfermedades infecciosas, inmunología e investigación biomédica, control de calidad, medicina veterinaria y ambiental.
     • El ELISA es una técnica sensible, específica, versátil, accesible y de alto rendimiento, pero requiere tiempo, equipo especializado y un buen manejo de reactivos para evitar errores en los resultados.

2. WESTERN BLOT

   • Usos: Se usa una proteína específica en una muestra de sangre o tejido. Fundamento:Mediante electroforesis se separan las Proteínas de la muestra, para diagnosticar enfermedades.
     • Ventajas Es muy específica. Se puede conocer si hay abundancia, la composición y tamaño de la proteína. Permite validar y confirmar resultados de otras técnicas. Se pueden utilizar varios medios para realizar la técnica.
     • Desventajas Es lento. Es muy sensible. Proporciona si existe abundancia , de una proteína no su concentración. Requiere de equipamiento específico.

3. INMUNOFLORESCENCIA

   • La inmunofluorescencia detecta antígenos en células o tejidos mediante anticuerpos marcados con fluorocromos que emiten luz al ser iluminados.
     • Ventajas: alta especificidad y sensibilidad, localización precisa y posibilidad de detectar varios antígenos a la vez.
     • Desventajas: requiere microscopio de fluorescencia, puede perder señal por fotodegradación y presentar uniones inespecíficas o limitada visualización en tejidos densos.

4. AGLUTINACIÓN

   • Las técnicas de aglutinación permiten detectar antígenos o anticuerpos de forma rápida y visible, y se usan en el diagnóstico de infecciones y en la tipificación sanguínea.
     • VENTAJAS: -técnica rápida y sencilla -resultados visibles
       • DESVENTAJA: -puede presentar falsos positivos -menor especificidad que otros métodos.

5. CITOMETRÍA DE FLUJO

   • La citometría de flujo permite analizar células en suspensión con láser y fluorescencia, midiendo sus características y proteínas. Se aplica en investigación (apoptosis), clínica e inmunología (VIH, leucemias) y en microbiología/biotecnología (cuantificación y control de procesos).
     • Ventajas: rápida, precisa, analiza muchas células a la vez, estudia múltiples parámetros, detecta subpoblaciones, alta sensibilidad y especificidad.
     • Desventajas: equipo y reactivos costosos, requiere personal especializado, preparación compleja de muestras, solo analiza células en suspensión y puede destruir células.

6. RADIOINMUNOENSAYO

   • El Radioinmunoensayo, es una reacción antígeno–anticuerpo, donde se utiliza un antígeno o anticuerpo marcado con un isótopo radiactivo, la cantidad de radiactividad medida es inversamente proporcional a la concentración del analito en la muestra. Dentro de sus usos destaca: la detección de hormonas y el monitoreo de fármacos en sangre.
     • Ventajas: Precisión y sensibilidad
     • Desventajas: Uso ilimitado debido al uso de radiactividad y su uso es muy costoso

7. PRECIPITACIÓN

   • Fundamento: se basa en la reacción entre un antígeno soluble y su anticuerpo específico, formando complejos insolubles (precipitado) cuando están en proporciones óptimas. Usos Identificación y cuantificación de antígenos o anticuerpos. Pruebas de diagnóstico (ej. infecciones bacterianas, micóticas). Análisis de pureza o similitud de proteínas.
     • Ventajas Técnica sencilla y económica. No requiere equipos sofisticados. Útil para antígenos solubles. Desventajas Baja sensibilidad: requiere concentraciones relativamente altas de antígeno/anticuerpo. Lento: la formación del precipitado puede tardar horas o días. No permite analizar múltiples parámetros a la vez. Menos utilizada frente a técnicas más modernas (ELISA, inmunofluorescencia).