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Funcionamiento del sistema CRISPR/Cas – edición de genomas
Description
Mind Map on Funcionamiento del sistema CRISPR/Cas – edición de genomas, created by Laura Camila Mayorga Lozada on 29/10/2019.
Mind Map by
Laura Camila Mayorga Lozada
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Laura Camila Mayorga Lozada
almost 5 years ago
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Funcionamiento del sistema CRISPR/Cas – edición de genomas
Pimera etapa
Adquisición de secuencias espaciadoras tras la exposición al patógeno.
Las secuencias se ubican en el citoplasma
Célula reconoce a PAM
Célula incorpora a PAM nucleótidos adyacentes como nueva secuencia espaciadora
Genera copia de la secuencia repetida.
Flanquea la espaciadora por ambos lados.
Segunda etapa.
Se transcribe el ARNcr
CRISPR I
Activa a Cas 3
CRISPR II
Activa a Cas 9
Se requiere tracrARN
Segundo ARN codificante
Complementario a secuencia palindrómic a repetida
Forma dímero con secuencias repetidas
Al finalizar la transcripción.
RNASA iii reconoce ARNcr/tracrARN.
Lo procesa para generar transcrito maduro.
CRISPR III
Activa a Cas 6
Tercera etapa
Cas se asocia con ARNcr maduro
Forma complejo CRISPR/Cas.
ARNcr guía al complejo hacia su blnco.
Por medio de reconocimiento se secuencia complementaria.
En caso de segunda infección
Secuencia espaciadora de ARNcr maduro reconoce y forma complejo ADN-ARN con el material exógeno.
Reconocido por los dominios de Cas: RUVc y HNH.
Cada uno corta una hebra distinta. (DSB)
Puede ser reparado de dos maneras:
Homóloga (HDR)
Requiere introducción de secuencia con alto porcentaje de homología en 5' y 3'.
No homóloga (NHEJ)
Puede resultar en inserciones o deleciones no deseadas.
Utilidad en edición de genomas
Inserción de genes por recombinación homóloga
CRISPR/Cas se dirige contra una secuencia específica
Induce corte en ambas cadenas.
Puede dirigirse a un locus e inducir HDR.
Es capaz de trabaja en simultaneo con varios genes.
Delección dentro del genoma
Gracias a actividad endonucleasa de Cas.
Se emplea para generar deleciones de fragmentos grandes de ADN
No hay correlación entre el tamaño y la frecuencia de deleciones.
Mutagénesis
Detección y generación de mutaciones específicas.
Mediante inserción de ARNg para varias secuencias específicas se induce mutagénesis.
Media attachments
Q (binary/octet-stream)
T (binary/octet-stream)
Er (binary/octet-stream)
W (binary/octet-stream)
Y (binary/octet-stream)
U (binary/octet-stream)
I (binary/octet-stream)
O (binary/octet-stream)
P (binary/octet-stream)
As (binary/octet-stream)
S (binary/octet-stream)
Dff (binary/octet-stream)
F (binary/octet-stream)
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