Técnicas utilizadas como INMUNOENSAYOS

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Mind Map on Técnicas utilizadas como INMUNOENSAYOS, created by Tamara Silva on 05/25/2015.

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Técnicas utilizadas como INMUNOENSAYOS
  1. Diferencias
    1. ELISA utilizan como marcador una enzima y el espectrofotómetro como sistema de detección
      1. iImunofluorescencia utilizan como marcador un fluorocromo y necesitan como sistema de detección el microscopio de fluorescencia
    2. InmunoFluorencencia
      1. Técnica utilizada para visualizar la distribución de una proteína o antígeno específico en células o secciones de tejido utilizando la especificidad de los anticuerpos por su antígeno para dirigir marcadores fluorescentes a las biomoléculas dianas de forma específica.
        1. Esta dividida en
          1. IFDirenta
            1. Se usa unión covalente previa del fluoróforo con el anticuerpo primario, sólo requiere una única etapa de incubación con el antígeno y una sola etapa de lavado. El marcador fluorescente generalmente produce una sustancia colorada o un aumento en la cantidad de luz emitida a una longitud de onda determinada, si el antígeno está presente. En el caso de ausencia de antígeno, no hay unión del anticuerpo primario marcado y por lo tanto no hay señal.
            2. IFIndirecta
              1. Consiste en el uso de un anticuerpo primario no marcado que se une específicamente al antígeno diana, y el anticuerpo secundario, que lleva el fluoróforo, reconoce el anticuerpo primario y se une a él. Varios anticuerpos secundarios pueden unirse al anticuerpo primario y esto proporciona una amplificación de la señal mediante el aumento del número de moléculas de marcadores fluorescentes por antígeno.
        2. ELISA
          1. Ensayo inmunoenzimático ampliamente empleado en el área médica para la cuantificación de moléculas especialmente de aquellas que experimentan cambios en diferentes estados como pueden ser infecciones por bacterias, virus, hongos o parásitos o fases activas de enfermedades autoinmunes.
            1. Divición
              1. Directa
                1. Fijación al soporte insoluble de antígenos específicos. Lavado para eliminar los antígenos fijados deficientemente o no fijados..
                  1. Adición de anticuerpos marcados . Lavado para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
                    1. Adición de substrato
                2. Indireta
                  1. Fijación al soporte insoluble de antígenos específicos para los anticuerpos objeto de estudio
                    1. Adición del suero problema, de tal forma que sus anticuerpos reaccionarán específicamente con los antígenos fijados al soporte. Lavado.
                      1. Adición de anti-anticuerpos conjugados con una enzima
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