Microscopia

Microscopia

1. Óptica

   • Usa uma ou uma série de lentes para ampliar imagens de pequenas com luz visível. As lentes são colocadas entre a amostra e o olho do visor para ampliar a imagem de modo que possa ser examinado em maiores detalhes.

2. Eletrônica e Varredura

   • As técnicas de Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET) e Varredura (MEV) utilizam um feixe de elétrons como fonte de “iluminação” sobre uma amostra a ser observada, ao invés de luz visível onde é possível a obtenção de imagens com resoluções espaciais da ordem de centenas a milhares de vezes.

3. Varredura por Sonda

   • O observador utiliza uma pequena sonda de extremidade muito afiada e que percorre a superfície da amostra a uma distância mínima. A sonda pode estar em contato com a amostra, mas, na maioria dos casos, está a uma distância muito pequena, da ordem de poucos nanômetros. Nessas condições, as forças resultantes das interações da sonda com os átomos ou moléculas da superfície, especialmente as interações intermoleculares de van der Waals, são significativas e podem ser medidas.

4. Antonie Van Leeuwenhoek

   • Primeiro a fazer observações microscópicas
   • microscópio de lente única
   • Primeiro a observar e descrever fibras musculares, bactérias, protozoários e o fluxo de sangue nos capilares sanguíneos de peixes.

5. Componentes

   • Revolver
     • utensílio giratório que acopla as lentes objetivas, modificando o aumento de acordo com o giro.
   • Base
   • Coluna
     • Parte que conecta o tubo à base do microscópio.
   • Charriot
     • Botões que movem a platina para a esquerda e direita ou para cima e para baixo.
   • Condensador
     • Controla o foco e posicionamento da luz sobre a amostra analisada.
   • Platina
     • plataforma plana que tem como função suportar o material ou lâmina que está em observação.
   • Fonte de luz
   • Lente ocular
     • Duas lentes que ampliam a imagem formada pelas objetivas, além de corrigir deficiências ópticas
   • Tubo ou canhão
     • Conecta a ocular às lentes objetivas.
   • Macrométrico
     • Foco geral para a amostra analisada.
   • Micrométrico
     • foco mais preciso e aumenta o detalhe da amostra analisada.
   • Lentes Objetivas
     • Aumento Linear
       • é a relação entre a imagem real fornecida pela objetiva e o objeto, ou seja, é quantas vezes a imagem será maior que o objeto, como 3,2X, 10X, 50X, etc.
     • Abertura Angular
       • é o ângulo entre os raios mais divergentes que penetram na objetiva a partir de um ponto enfocado pela objetiva.
     • Abertura Numérica (AN)
       • é considerada como sendo a quantidade de luz que efetivamente penetra na objetiva e é dada pela expressão:

6. Robert Hooke

   • Invenção do microscópio composto, com lentes múltiplas (geralmente três - uma ocular, uma lente de campo e uma objectiva)
   • Obra "Micrographia"

7. Limite de Resolução

   • LR= λK/NA
     • K=Constante/0,61
     • λ=Longitude de onda da luz (em µm)
     • NA=Abertura numérica Cálculo do limite de resolução

8. Confocal

   • Utiliza um único fóton . Imagens 2D e 3D das células.

9. Dois fotóns

   • Dois fotóns. Formar células vivas de até 1 mm de espessura.

10. Acústica de Varredura

    • Utiliza ondas sonoras de frequência especifica. Examinar células vivas aderidas em outras superfícies.

11. Características importantes do microscópio

    • Aumento total/Poder de penetração/Distância focal/Poder definição/Poder de resolução

12. Dimensões celulares

    • Célula vegetal=50µm
    • Célula animal=10-20µm
    • Bactéria=1-2µm
    • Virus=0.05-0.2µm

13. Interações da Luz

    • Reflexão
      • Fenômeno em que uma onda de luz atinge uma superfície e muda de direção e/ou sentido, mas continua no mesmo meio de propagação.
    • Transmissão
      • Acontece quando a luz atravessa uma superfície ou objeto.
        • Transmissão direta: acontece quando a luz atravessa um objeto e não se produzem câmbios na direção ou qualidade dessa luz. Por exemplo, um vidro ou o ar.
        • Transmissão difusa: se produz quando a luz passa através de um objeto transparente ou semitransparente com textura. Por exemplo, um vidro esmerilado. A luz, em vez de ir em uma direção só, é desviada em muitas direções.
        • Transmissão seletiva: é produzida quando a luz atravessa um objeto colorido. Parte da luz vai ser absorvida e parte vai ser transmitida por esse objeto. No exemplo a seguir a luz branca (vermelho, verde e azul) passa através de uma superfície vermelha. O verde e o azul são absorvidos e somente se transmite o vermelho. Assim, do outro lado da superfície vamos ver luz vermelha.
    • Absorção
      • consiste na diminuição da energia de uma radiação, neste caso a luz, na sua passagem através da matéria, isto é, uma acumulação na matéria de parte da energia proveniente de radiações luminosas.
    • Refração
      • Fenômeno que consiste na mudança de velocidade de propagação da onda eletromagnética quando essa atravessa meios ópticos diferentes. Durante a refração, o comprimento de onda da luz muda, enquanto a sua frequência permanece constante.

14. Zacharias janssen

    • Junto ao também inventor holandês Hans Lippershey, Zacharias Janssen é creditado como inventor do microscópio composto com duas lentes no início da década de 90 do século XVI.
    • A invenção do telescópio