MAPA CONCEPTUAL BIOTECNOLOGIA

MEDIOS DE CULTIVO

DEFINICIÓN: Es una solución de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos.

CLASIFICACIÓN SEGÚN SU COMPOSICIÓN

- COMUNES O UNIVERSALES: tiene como objetivo el crecimiento de la mayor parte de los microorganismos poco existentes y es el medio más frecuentemente utilizado para mantener colonias microbianas (agar común o caldo común)

AGAR NUTRITIVO

Medio sólido que se prepara añadiendo agar a un caldo nutritivo.

Diferentes versiones con distintos componentes (peptona, triptona-soja, infusión de cerebro y corazón, agar Brucella, agar Columbia, etc).

AGAR SALINO MANITOL

Es un medio selectivo para estafilococos debido a la alta concentración de cloruro sódico (7.5%). Manitol como agente diferencial, rojo fenol como indicador.

AGAR CHOCOLATE

Misma base que el agar sangre. Los eritrocitos se adicionan a la base fundida y luego se eleva la temperatura (alrededor de 85°C) para lisar parcialmente las células, y es por eso que el medio es color pardo-chocolate.

AGAR MACCONKEY

Es utilizado para la recuperación de enterobacterias y bacilos Gram negativos entéricos relacionados. Los inhibidores son la cristal violeta y las sales biliares. La lactosa como agente diferencial y el rojo neutro como indicador.

AGAR SANGRE

Se prepara añadiendo un 5% de sangre procesada (oveja, caballo, conejo, etc.) a un agar base rico (agar Columbia). También, se utiliza para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos, por lo que se considera un medio diferencial.

AGAR SS

Lleva sales biliares, citrato sódico y férrico, tiosulfato y el colorante verde brillante. El carácter diferencial se basa en la fermentación de la lactosa. Rojo neutro como indicador.

CALDO NUTRITIVO

Contiene extracto de carne y cloruro sódico. Puede complementarse con peptonas, extracto de levadura y/o glucosa.

AGAR EMB

Es un medio diferencial y selectivo para aislar y detectar enterobacterias en muestras mixtas. Inhibidores: eosina y azul de metileno. Lactosa como agente diferencial.

AGAR GLUCOSA SABOURAUD

Fue desarrollado para el cultivo de hongos patógenos. Se recomienda sólo para el aislamiento primario de dermatófitos, con el agregado de cicloheximida y cloranfenicol.

AGAR MUELLER-HINTON

Es un medio de cultivo rico, diseñado especialmente para hacer ensayos de sensibilidad.

Permite el crecimiento de Neisseria y Haemophilus

No fermentadoras de lactosa (transparentes): Shigella, Salmonella, Providencia, Proteus.

Fermentadoras de lactosa (rosa/rojo/violeta): E. coli, Enterobacter, Klebsiella.

*E. coli puede presentar un halo rosa alrededor de las colonias*

- ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento y se le puede agregar exceso de nutrientes tales como suplementos nutritivos, sangre, suero, líquido ascítico, entre otros. Es utilizado para microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales.

- SELECTIVOS: son sólidos que se consiguen alterando las condiciones físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos para reprimir el crecimiento de especies químicas que no interesa su crecimiento. En este tipo sólo se permite el crecimiento de un grupo de microorganismos y reprimiendo el de otros. Uno de sus objetivos es para seleccionar y aislar microorganismos de poblaciones mixtas. Ejemplos: Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos estafilococos).

- DIFERENCIALES: son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre varios géneros y especies de microorganismos. Ejemplo: Agar con azul de metileno - eosina permite diferenciar E. coli (colonias oscuras y de brillo metálico) de Enterobacter aerogenes (colonias rosadas de centro azul sin brillo). Estos dos microorganismos en agar nutritivo producen colonias de color gris blancuzco.

Factores selectivos que alteran las condiciones del medio:

* Cambio de pH

* Cambio de temperatura

* Alteraciones osmóticas

* Ajuste en la tensión de oxígeno

* Ajuste en la tensión de anhídrido carbónico

Factores que inhiben el crecimiento de bacterias indeseables:

* Antisépticos

* Antibióticos

- DE ENRIQUECIMIENTO: son medios líquidos que contienen un agente que reprime las especies no deseadas pero que favorece el crecimiento incondicional del agente infeccioso. Por lo tanto, aquellos microorganismos para los que el ambiente sea más favorable crecerán más que los otros y finalmente serán predominantes

- DE TRANSPORTE: son utilizados para asegurar la viabilidad de la bacteria sin multiplicación significativa de los microorganismos desde el momento de su extracción hasta su posterior estudio.

Crecen una gran mayoría de microorganismos, excepto algunos muy exigentes.

Aislamiento de microorganismos. No permite el crecimiento de Neisseria y Haemophilus.

Para microorganismos no exigentes

Aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella de muestras de heces o hisopados rectales.

Las colonias lactosa positivas (rojo).

Las lactosa negativas (transparentes): Shigella.

Las colonias de Salmonella (transparentes con el centro negro).

Aislamiento selectivo de estafilococos y micrococos.

Fermentan manitol: Staphylococcus aureus (dan colonias amarillas).

No fermentan manitol: S. epidermidis (dan colonias blancas)

Aislamiento de bacterias gram negativas (enterobacterias). Los colorantes inhiben las gram positivas.

Fermentadoras de lactosa (rosa/rojo/violeta): Enterobacter y Klebsiella.

Las no fermentadoras de lactosa (transparentes): Salmonella, Providencia, Shigella y Proteus

* E. coli se ve de color verde metálico

Aislamiento de hongos patógenos dermatofitos.

No lleva inhibidores de los antimicrobianos. También, aisla y mantiene Neisseria y Moraxella.