Untitled

PREPARACIÓN DE MUESTRAS

FIJACIÓN

TÉCNICA HISTOLÓGICA

TIPOS DE MONTAJE

TÉCNICA DE LA PARAFINA FUNDIDA

OBTENCIÓN DE CÉLULAS

FIJACIÓN

Los tejidos se tiñen para aumentar el contraste natural y hacer más evidentes los diversos componentes celulares, tisulares, así como el material extrínseco. La mayoría de los colorantes se usan en solución acuosa y otros en alcohol.

TÉNICA CITOLÓGICA

CLASIFICACIÓN DE TÉCNICAS DE TINCIÓN

TÉCNICA POR CONGELACIÓN

Una vez que la muestra se ha secado, se procede a la observación detallada en el microscopio.

*Se va a extirpar una lesión por completo con su respectivo margen de seguridad

*Tiene tanto un fin diagnostico como un fin de tratamiento

Impronta o sello

Cuando se trata de células obtenidas por impronta o células exfoliadas o descamadas provenientes de mucosas de cualquier cavidad natural del organismo (boca, ano, vagina, etc.). Dichas células son obtenidas por biopsia, que puede ser por cepillado o raspado, acto seguido se realiza el frotis, se fijan y se tiñen. Se exponen los pasos a continuación:

Bálsamo del Canadá

FROTIS

Es la distribución de la muestra celular obtenida en la laminilla portaobjetos. Debe ser ligero y bien extendido

TINCIÓN

Resina sintética

OBSERVACIÓN

MONTAJE

*Se toma solo una porción de la lesión (en ocasiones se puede tomar tanto tejido sano como tejido dañado

*Se va a utilizar en lesiones de fácil acceso como por ejemplo en lesiones cutáneas

*Tiene una finalidad diagnostica

*Se va a obtener un fragmento de la lesión pero con pinzas especiales que se les conoce como PINZAS SACABOCADO

Supravitales

Zig-zag

Cuando se aplican una vez fijada la muestra

Deslizamiento

El montaje nos permite obtener resultados visuales mejores, protege al frotis teñido de las lesiones físicas y del blanqueamiento y deterioro del colorante a consecuencia de las oxidaciones.

TIPOS DE FROTIS

Sándwich

Es soluble en xileno, se emplea como solución al 60%

Sacabocado

Excisional o de extirpación

Por aspiración

Punch

Incisional

Debe ser realizada inmediatamente después de realizado el frotis y su finalidad es evitar la citolisis (putrefacción) de los tejidos

Por punción

Por trepanación

Oleorresina que se recoge de la corteza de una variedad de abeto que se encuentra en la mitad oriental del Canadá. Es transparente, en capas delgadas, se adhiere firmemente al vidrio y adquiere una consistencia muy dura sin granulación; es muy soluble en xileno

*Usada principalmente por dermatólogos para muestrear enfermedades inflamatorias de la piel o tumores pequeños

*Se obtiene una biopsia pequeña de 3 a 4 mm de diámetro

* Se va a obtener una porción cilíndrica de la piel

Cuando no provocan la muerte celular, se utilizan para teñir material vivo. Por ejemplo, azul de metileno, rojo neutro, moreno de Bismarck, Fast Green.

Vitales

¿Qué es?

A cielo abierto o transoperatoria

Por raspado

Esterotaxica

*Se va a introducir una aguja y se va a aspirar el contenido que se quiera examinar

Punción con aguja fina

*Se le conoce como BACAF

*Se va a tomar el líquido o semilíquido para el estudio citológico respectivo

*Se ocupa en nódulos linfáticos, lesiones de cabeza, lesiones en tiroides, nódulos hepáticos

Punción con aguja gruesa

*Su nombre comercial es aguja Tru-cut

*Se va a utilizar una pistola automática

*Está guiada por medios de imagen

*Su uso más común es para diagnosticar cáncer de próstata

*Se utiliza estructura de gran densidad

*Se va a ocupar un taladro o trépanos

*Se va a introducir una aguja y se va a aspirar el contenido que se quiera examinar

* Biopsia de aspiración con aguja (BAAF): se realiza con agujas de calibre 22-25

*Se utiliza en el curso de una intervención quirúrgica

*Se utilizan dispositivos como el micrótomo y criostato

*Consiste en el arrastre mecánico del tejido con curetas apropiadas

*Se ocupa en lesiones que se encuentran entre la epidermis y la dermis

*Se ocupa para lesiones óseas

*Se hacen cortes transversales y longitudinales por medio de programas especiales donde va a permitir coordenadas exactas de una zona específica

*Se va a conocer la muestra en 3D

*Se aplica principalmente en cerebro, pulmón, riñón y zona del abdomen

¿Qué es?

Características

Características

Características

Características

Características

Características

Características

Características

Características

Características

Se divide en:

¿Qué es?

¿Qué es?

¿Qué es?

Se trata de la técnica para hacer cortes finos a los tejidos gruesos, en la que estos cortes se requiere del micrótomo, pero estos cortes no se pueden realizar sin antes endurecer los tejidos y esto se logra por dos técnicas diferentes que son:

Debe ser realizada inmediatamente después de realizado el frotis y su finalidad es evitar la citolisis (putrefacción) de los tejidos

TIPOS DE FIJACIÓN

Físicos

Químicos

Calor

Frío

Consiste en:

Se dividen en:

Consiste en:

Aldehídos

Oxidantes

Desnaturalizantes de proteínas

El cambio de temperatura del tejido

Soluciones acuosas compuestas por moléculas fijadoras que van a establecer puentes entre las moléculas del tejido, es decir, las va a mantener unidas y van a impedir que se degraden

Se divide en:

¿Qué es?

DESHIDRATACIÓN

Eliminar el agua de los tejidos

El alcohol etílico en concentraciones crecientes iniciando con alcohol de 70°, finalizando con alcohol absoluto

Finalidad:

¿Cómo se hace?

ACLARACIÓN O DIAFANIZACIÓN

Finalidad:

Es embeber la pieza con una sustancia miscible con la parafina

Duración:

Duración:

De 1 a 6 hrs. dependiendo el tamaño de la muestra

De 6 a 24 hrs. dependiendo el tamaño del tejido

Benzol, xilol o toluol

Solventes de la parafina y del alcohol

IMPREGNACIÓN CON PARAFINA FUNDIDA

Generalmente realizada en estufas a 60° C

De 30 minutos a 6 horas dependiendo del tamaño de la muestra

¿Dónde se realiza?

Finalidad:

La parafina tiene que penetrar en los vasos, espacios intercelulares e interior de las células impregnando el tejido endureciéndolo y haciendo más fácil la obtención de cortes por el micrótomo

Duración:

INCLUSIÓN

Es la obtención del bloque de parafina en forma regular para ser cortada por el micrótomo

Finalidad:

¿Cómo se hace?

La pieza se coloca en un molde rectangular que contiene parafina fundida

ÚLTIMO PASO

Eliminar la parafina impregnada en los tejidos antes de teñir

Se introduce el tejido ya depositado en el portaobjetos en benzol, xilol, toluol o en cualquier solvente de parafina, posteriormente se rehidratarán los tejidos iniciando con alcohol absoluto y finalizando con alcohol del 70°. Posteriormente, se procederá a la tinción.

Mediante biopsia que se define como la obtención de un tejido proveniente de un organismo vivo para observarlo al microscopio con un propósito de diagnóstico e investigación; en cambio, necropsia es tejido proveniente de un organismo muerto. Existen varios tipos de biopsias y son las siguientes:

Finalidad:

¿Cómo se hace?

Pasos:

Es otra forma de endurecer a los tejidos usando el micrótomo de congelación (criostato)

¿Qué es?

Los tejidos son endurecidos por congelación, permitiendo el corte de manera rápida sin pasar por todas las etapas anteriormente descritas cuando se usa parafina, son muy utilizados en hospitales cuando se requiere un diagnóstico rápido de material patológico, tomado en intervenciones quirúrgicas y en el cual el cirujano no puede esperar mucho tiempo el diagnóstico histopatológico (transoperatorio).

¿Qué es?

TIPOS DE FIJACIÓN

El cambio de temperatura del tejido

Soluciones acuosas compuestas por moléculas fijadoras que van a establecer puentes entre las moléculas del tejido, es decir, las va a mantener unidas y van a impedir que se degraden

Consiste en:

Consiste en:

Físicos

Químicos