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tincion de gota fresca

fase preanalitica

fase analitica

fase postanalitica

material necesario

Poner sobre un portaobjetos una gota de agua y una pequeña alícuota de un

cultivo bacteriano

 Hacer el frotis, formando una película homogénea sobre el portaobjetos Dejar secar.

 Fijar la preparación, pasando a través de la llama del mechero el portaobjetos.

 Cubrir con unas gotas de cristal violeta durante 1 minuto.

 Añadir el mordiente lugol, solución de yodo-ioduro potásico, durante 1 minuto.

 Lavar el exceso de mordiente con agua.

 Lavar la preparación con alcohol formando un ángulo con la preparación,

durante 30 segundos

se evalua

Cultivos de bacterias gram positivas: Bacillus cereus y gram negativas: Escherichia

coli, frasco lavador, cristalizador, soporte, portaobjetos, asa de siembra, cristal violeta,

safranina, lugol y alcohol, aceite de inmersión

Lavar inmediatamente con abundante agua.

 Cubrir con el colorante de contraste, safranina durante 1 minuto.

 Lavar el exceso de colorante con agua.

 Dejar secar al aire.

 Añadir una gota de aceite de inmersión.

 Observar con objetivo de inmersión (100 x).

bacterias gram positivas mantienen y conservan el complejo cristal violeta-iodo, las

bacterias gram negativas se decoloran rápidamente con la aplicación del alcohol,

admitiendo el colorante de contraste que proporciona un color entre rosa y rojo que

contrasta con el intenso color violeta

urocultivo antibiograma

fase preanalita

fase analitica

fase postanalitica

Elementos necesarios:

Guantes estériles.

Jeringas y butterfly o agujas estériles

Iodopovidona, o alcohol iodado.

Alcohol 70%.

Frascos para la recolección de las muestras.

(Elegir el frasco adecuado según tipo de paciente o situación clínica.)

La orina remitida al laboratorio se homogeniza convenientemente y se

divide en dos partes, una sirve para el estudio del sedimento y, la otra, para el

urocultivo. A partir del sedimento obtenido por centrifugación a 2500 rpm.

Durante 10 minutos, se hace una observación en fresco entre porta y cubre, que

orienta sobre el número de microorganismos presentes en la orina, y un frotis, que

se colorea por el método de Gram.

El resultado se

expresa en forma de UFC/ (unidades formadoras de colonias) mL de orina. Cada

colonia representa al menos una bacteria en la orina original. Se requieren 24-48 h

más para identificar el germen y conocer el antibiograma

Actividades previas:

LAVARSE LAS MANOS con antiséptico y secarlas con toalla descartable.

Rotular el frasco con los datos del paciente en el lugar indicado para ello.

Si tuviera código de barras: NO pegar tela adhesiva sobre el mismo

Retirarl el sticker y pegarlo en el protocolo de pedido.

Quitar la tapa protectora del frasco (plástica) y desinfectar con alcohol 70% el tapón de goma.

Limpiar la piel del paciente con alcohol 70%. Dejar secar. Palpar la vena a punzar.

Antes de establecer el tratamiento de una enfermedad de etiología

microbiana, es conveniente efectuar un antibiograma, es decir, un estudio de la

sensibilidad del germen productor de la infección a los antimicrobianos.

Un microorganismo se considera resistente a un antibiótico cuando la

concentración máxima de antimicrobiano que se puede conseguir en el lugar de la

infección (líquidos, tejidos o suero) no es suficiente para afectarle, o, dicho de otra

forma, que la concentración de la droga en aquel punto es inferior a la CMI

necesaria para eliminar el germen, y que por efectos secundarios tóxicos es

imposible elevar la dosis.

EMO

Fse preanalitica

fase analitica

fase post analitica

La recolección de la muestra de orina se realiza en la

primera micción de la mañana; la bolsa recolectora, la punción

supra-púbica (1) y el cateterismo vesical (2) son los métodos

recomendados en los menores de 2 años cuando aún no hay

control de esfínteres (3), mientras que la recolección por

micción espontánea es el método aconsejado para los mayores

de 2 años

Lavar el área genital y perineal del paciente con suficiente

agua y jabón momentos antes de la toma de la muestra. No

utilizar antisépticos (3,7,8).

Tener listo el frasco recolector de orina, sin uso, estéril

(2) y sellado.

Tomar la muestra de orina a partir del chorro medio (9)

descartando la primera parte de la micción. La orina

recolectada en el frasco no debe ser tocada ni por los dedos

ni por ningún otro objeto.

Recolectar un volumen de orina suficiente para su estudio

—10cm mínimo

Evitar que la orina rebose el frasco, el rebosamiento facilita

su contaminación (10).

Sellar inmediatamente el frasco una vez recolectada la orina

y rotularlo con el nombre del paciente, número de historia

clínica, hora y fecha de recolección.

Conservar el frasco en un lugar seguro, evitando la exposición

solar y los movimientos constantes —agitación

Procesar la muestra en el laboratorio clínico lo más pronto. Si

después de 30 minutos de recolectada no se procesa, se debe

refrigerar en la puerta de la nevera a 4 grados centígrados (11)

por un tiempo máximo de 24 horas

fisico

quimico

Aspecto: la orina es límpida y transparente (11). Existe

turbidez por presencia de células, cristales, cilindros,

detritus, proteínas, grasas y moco en las muestras de orina

Color: el color de la orina es ámbar-amarillo (18),

dado por la presencia del pigmento urocromo

Rojo: en hematuria no glomerular, hemoglobinuria,

mioglobinuria, uso rifampicina e infecciones por Serratia

marcescens.

Café oscuro: en melanuria, hemorragia antigua y hematuria

glomerular.

Amarillo verdoso: en síndrome ictérico y hepatitis.

Verde azulado: en infección por Pseudomona aeruginosa

Blanco lechoso: en síndrome nefrótico.

Vino tinto: en porfiria

Olor: el olor de la orina es débilmente aromatizado

debido a la presencia de ácidos orgánicos volátiles y

amoniacal por descomposición de la urea (

Fruta dulce: diabetes mellitus.

Azúcar quemada: leucinosis.

Ratón: fenilcetonuria.

Pescado: hipermetionemia.

Sudor de pies: aciduria por ácido butírico o hexanoico

pH: el pH urinario varía de 4.5 a 8

La orina es alcalina cuando su pH es mayor a 6.5 (16), como

sucede en dietas vegetarianas, ingesta de diuréticos, alcalosis

respiratoria, vómito, acidosis tubular renal distal o tipo I y

en aquellos casos donde la urea se convierta en amoníaco

y aumente el pH —como sucede en las orinas procesadas

tardíamente y en las infecciones por Proteus spp, productor

de amoniaco gracias a la acción de la ureasa

pH menor a 6 se

considera ácida y se da por dietas hiperproteicas, ceto-acidosis

diabética, infecciones por E. Coli, fiebre, acidosis respiratoria,

aciduria por ácido mandélico y fosfórico, administración de

fármacos como anfotericina B, espironolactona y Aines

densidad urinaria

su valor varía durante todo el día oscilando

entre 1.003-1.030g/l (16,19,20), siendo mayor a 1.020 en

la mañana debido a la restricción de líquidos durante la

noche. Los recién nacidos y los lactantes pueden tener una

densidad urinaria entre 1.005-1.010g/l y los niños mayores

1.010-1.025g/l

osmolaridad

sus valores varían entre 50-1200mOsm/Kg y su rango normal

es de 500-850.

nitritos

Nitritos: su valor en orina debe ser cero (15). Es un método

indirecto para determinar la presencia de bacterias en la orina

(18). Las enterobacterias como la E. Coli tienen la particularidad

de reducir los nitratos a nitrito

proteinas

Proteínas: normalmente no se deben reportar proteínas

en la orina; su valor debe ser menor a 4mg/m2/hora.

glucosa

Glucosa: se detecta a través de la reacción de la glucosa

oxidasa/peroxidasa (11). La lectura de glucosuria debe ser cero

porque la glucosa filtrada es reabsorbida casi en su totalidad

(99.9%) en el túbulo contorneado proximal y solo aparece en

la orina cuando el valor de la glicemia supera el umbral renal

tubular de reabsorción de glucosa estipulada entre 160-180mg/

dl o cuando hay daño en el túbulo proximal renal

cetonas

Cetonas: su lectura debe ser cero; la presencia de cetonuria

está relacionada con alteraciones en el metabolismo de los

ácidos grasos y de los carbohidratos

urobirinogeno

encuentra normalmente en concentraciones bajas, alrededor de

1mg/dl (

bilirrubina

Bilirrubinas: su lectura es negativa (15). Cuando se

presenta bilirrubina en la orina es conjugada o directa, ya que

por ser hidrosoluble pasa el glomérulo renal, l

sangre

lgunas patologías presentes en los niños y que pueden

cursar con hemoglobinuria son las anemias hemolíticas, el

déficit glucosa 6 fosfato deshidrogenasa, la hemoglobinuria

paroxística nocturna, el paludismo, las infecciones y los

infartos renales

microscopico

Para el análisis microscópico se consideran como

componentes del sedimento urinario las células, los cilindros

y los cristales.