Flashcards
omicas
Cards in this deck (17)
- 1quais são as etapas da proteomica?-extração de proteinas
metodos de extracao de proteinas (TCA, fenol)
separacao por massa
-eletroforese 2D
meotodo para separacao e visualizacao de proteinas
separacao por ponto isoéletrico e massa
-Espectometria de Massa
analise de alta confiabilidade e identificaçao de proteinas
fragmentacao de proteinas
analise de peptideos - 2quais os metodos mais utilizados de extração de proteinas?TCA e fenol
- 3existe um metodo universal para a extração de proteinas totais?nao
- 4Qual o objetivo da lise celular no processo de extração de proteinas totais?liberação das organelas e demais constituintes quimicos da celula, sendo eles, lipideos, carboidratos, sais, proteinas, enzimas e acidos nucleicos
- 5qual o objetivo da inativação de enzimas proteoliticas no processo de extração de proteinas totais?inibir a degradação das proteinas, durante estoque e análises
- 6quais são os interferentes removidos no processo de extração de proteinas totais?sais (solventes organicos como alcoole ce tona) lipideos (alta centrifugação, utilização de alcool ou cetona) acidos nucleicos e polissacarideos (TCA)
- 7o porcesso de solubilização na extração total de proteinas tem qual finalidade?quebrar todas as interações entre macromoleculas - interações nao covalentes e as pontes dissulfeto
- 8quais sao os metodos utilizados para quantificacao das proteinas?colorimetrico e nao colorimetrico
- 9o que é o metodo de Bradford?
- 10como acontece o metodo de coloração de proteinas por meio do nitrato de prata?nesse tipo de coloração por prata, os geis sao impregnados com o ion soluvel ag+ e revelados por tratamento com um agente redutor. As biomoleculas presentes no gel, promovem a reducao do ion a Ag0, insoluvel e visivel, dessa maneira, é permitido a visualização das bandas presentes
- 11quais os metodos colorimetricos e suas caracteristicas?
- 12O que é SDS-PAGE?um tipo de eletroforese que é realizada em condições desnaturantes pra realização de proteínas
SDS-PAGE = Eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) com dodecil- sulfato de sódio (SDS) - 13o que é 2D-Page?é uma metodologia que realiza duas eletroforeses sucessivas
Focalização isoelétrica em gel com gradiente de PH e eletroforese em gel SDS-poliacrilamida - 14qual a primeira dimensao da 2D-SDS PAGE?a primeira dimensão tem como alvo a separação através do ponto isoelétrico
conta com um gradiente de PH imobilizado e as correntes eletricas são as reponsaveis por levar as proteinas ate alcancar o ponto isoeletrico - 15o que é e o que acontece no ponto isoletrico?é um metodo para separação de carga
com baixo PH vai estar (+) carrega e alto PH (-) carregada. no ponto isoelétrico a proteina nao tem carga liquida e por conta disso nao migra mais no campo eletrico - 16qual a segunda dimensao do 2D-SDS-PAGE GEL?nessa segunda etapa vai ter a separação por massa
PH gel strip é colocado em um gel SDS
o SDS vai desnaturar a proteina e ajeitar as cargas delas para que a movimentação que ocorra no gel seja somente por conta da massa de cada fragmento - 17quais as desvantagens do 2D-SDS-page
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- Flashcards on omicas, created by IRENE MARIA COLACO JACQUES PORSDOTTIR on 11/03/2024.
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- IRENE MARIA COLACO JACQUES PORSDOTTIR
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