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Electroforesis de ADN y ARN

Preparación del gel de agarosa

Diluir la agarosa en un buffer (TBE x1)

Calentar la agarosa hasta que hierva

Dejar enfriar la solución hasta 50°C mas o menos

Agregar bromuro de etidio para que la solución quede concentrada a 0.5 μg/ml

Servir la agarosa en la bandeja cuando la temperatura se aproxime a 45°C

Deje polimerizar las mezcla durante 10 o 15 minutos

Elimine todas las burbujas y posicione el peine donde debe ser

Posicionar el molde con el gel en la cubeta de electroforesis

Adicionar buffer TBE 1x para retirar el peine de forma adecuada y visualizar los pozos

Sembrar las muestras de ARN o ADN junto con el marcador

Evite que se salgan del pozo

Se puede romper el gel

Conectar la cámara de electroforesis

Durante 30 minutos ,-80 voltios y 25mA

Llevar el gel hasta el transiluminador de luz ultravioleta

Preparación de las muestras

En microplaca de 96 pozos adicionar 2 μl de buffer de carga en tantos pozos como muestras tenga

Buffer adicioal para el marcador de peso

Adicionar y mezclar en cada pozo 5 μl de ADN o ARN

Utilizando puntas distintas

Utilizar con la misma punta

Preparar de manera similar el ADN que servirá de peso molecular