MICROSCOPIO

MICROSCOPIO

Se requiere microscopio de campo claro para el examen microscópico de orina y otros fluidos corporales hay que proporcionar Especial cuidado a este ya que se usa en una parte integral del trabajo en el laboratorio y los microscopios con lentes de calidad son costosos la adquisición de un microscopio adecuado es de suma importancia el entrenamiento adecuado en el uso y apropiado mantenimiento y limpieza el microscopio es crucial para la maximización de su potencial el usuario debe estar familiarizado con cada uno de los componentes del microscopio y su función así como los procedimientos de ajuste y alineación adecuados
Microscopio de campo claro
1. Un microscopio de campo claro produce una imagen ampliada de la muestra que aparecen oscura en un fondo brillante o un microscopio de campo claro consta de un solo lente que se conoce como lupa en el laboratorio clinico sin embargo los microscopios de campo claro compuestos predominan y consisten en dos sistemas de lentes
2. El primer sistema de lentes localizado más cerca de la muestra es el objetivo montado de la boquilla el objetivo produce la primera imagen ampliada y la dirige al segundo sistema de lentes el ocular
3. Si el ocular también determina el diámetro del campo de visión observado este diámetro se establece por un defecto redondo del ocular y se indica mediante el número de campo asignado al ocular los números de campo que predominan en los microscopios de laboratorio clínico típicamente están en el rango de 18 a 26
4. El cuerpo o estructura del microscopio sirve para mantener a estos cuatro componentes básicos en su lugar
5. 1 tubo óptico con sus lentes oculares y objetivos
6. 2 un porta objeto sobre el cual la muestra se coloca para su visualización
7. 3 un condensador para enfocar la luz sobre la muestra y4 una fuente de iluminación
8. Ocular
  1. Mientras algunos microscopios tiene un solo ocular los que se utilizan en la mayoría de los laboratorios clínicos tienen dos oculares sin embargo cuando se utiliza un microscopio monocular siempre ver con los dos ojos abiertos ayuda a reducir la vista cansada con el microscopio binocular los ajustes de los oculares son necesarios para garantizar una visualización óptima
  2. La distancia interpupilar de los tubos del ocular se ajusta simplemente deslizando los para juntarlos o separados
  3. El ente magnífica o reduce las letras ahora gire las gafas 45 grados si las letras cambian en un gitud y ancho las gafas contienen corrección tórica y deben ser usadas cuando se usa el microscopio si las letras no cambian las gafas tienen sólo corrección esférica y no necesitan ser usadas para trabajar en microscopio
  4. Los usuarios de gafas deben considerar mantener sus gafas a la hora de trabajar en el microscopio y protectores de goma disponibles que se ajustan sobre los oculares para evitar arañazos en los lentes las personas con correcciones esféricas miopía e hipermetropía pueden trabajar el microscopio sin sus gafas
9. Platina mecánica
  1. la platina mecánica está diseñada para mantener firme en su lugar la lámina para ser examinada la platina tiene botones de ajuste convenientemente ubicados para mover la parte frontal deslizando hacia atrás y de lado a lado
  2. Al ver la lámina el usuario de la imagen de arriba hacia abajo
  3. Mediante el registro de los valores de las escalas de vernier horizontal y vertical la lámina puede ser removida y luego puede ser colocada de nuevo en el campo de visión idéntico y reexaminar se
10. CONDENSADOR
  1. Se encuentra debajo de la platina mecánica Está compuesto de dos lentes
  2. El propósito Es distribuir uniformemente y óptimamente el enfoque de luz desde la fuente de iluminación sobre la muestra
  3. El diafragma de apertura es usualmente un diafragma Iris compuesto de hojas de metal fino que pueden acostarse para abrir y formar varios diámetros
  4. El propósito del diafragma de apertura es controlar el ángulo de la luz de iluminación presentado a la muestra y al lente del objetivo
  5. Uno de los errores más comunes es usar el diafragma de apertura para reducir el brillo del campo de imagen al hacerlo la resolución disminuye por el contrario el usuario debe disminuir la intensidad de la Fuente de la luz o colocar un filtro de densidad neutra sobre la Fuente
11. Sistema de iluminación
  1. La fuente de luz es una lámpara de tungsteno o tuxteno halógeno localizado en la base del microscopio
  2. Esta lámpara menudo es fabricada específicamente para asegurar la alineación del filamento de la lámpara cuando una bombilla requiere un cambio
  3. Uno debe ajustarse a la intensidad de la luz bajando la intensidad de la lámpara o mediante la colocación de filtros de densidad neutra sobre la Fuente
  4. Los filtros se marcan para indicar la reducción hecha por ejemplo no densidad neutra de 25 permite que pase 75% de la luz
12. Objetivos
  1. Son componente más importante del microscopio porque ellos producen la primera ampliación de la muestra
  2. Se localizan sobre un puente giratorio sólo se usa un objetivo en un momento los objetivos se cambian fácilmente con una simple rotación del puente sin embargo cada objetivo tiene una instancia de trabajo Es decir la distancia entre el objetivo Y el cubreobjetos sobre la lámina
  3. Un microscopio tiene botones de ajustes de foco grueso y fino el usuario puede enfocar el microscopio moviendo la platina mecánica que sostiene la pieza de arriba abajo
  4. Algunos objetivos son diseñados para usarse con cubreobjeto si se requiere un cubreobjeto su espesor está grabado sobre el lente después de la longitud del tubo óptico
  5. Los objetivos se corrigen para dos tipos de aberraciones cromáticas y esféricas la aberración cromática se presenta porque diferentes longitudes de onda de la luz curva en diferentes ángulos después de pasar a través del lente
  6. Los objetivos corregidos que traen los componentes rojo y azul de la luz blanca el mismo foco son llamados acromaticos y no pueden tener una designación grabada sobre ellos
  7. Los objetivos que traen La Luz Roja azul y verde a un foco común son denominados acromaticos y son identificados con la inscripción apo
  8. La primera característica que se denomina par se entere y relaciona la habilidad del lente de objetivo para retener el mismo centro de fod cuando el usuario cambia de un objetivo a otro
  9. La segunda característica denominada parfocal se refiere a la habilidad de los objetivos de permanecer en el foco independiente del objetivo usado
  10. Nunca usar el condensador y el diafragma de apertura para reducir el brillo de la imagen más bien disminuir la intensidad de iluminación o usar filtros de densidad neutra
13. Número de Campos oculares
  1. Los oculares junto con los lentes del objetivo realizan dos importantes funciones
    1. 1 el diámetro del campo de visión
      1. El diámetro del f o v es determinado por un deflector redondo o un reborde interior de cada ocular y este valor numérico es conocido como número de campo ocular
        En otras palabras y una regla métrica fuera puesta en la Platino San el objetivo 1 x el diámetro del círculo de vista observado cuando se mira a través de los oculares mediría 18 milímetros
        Cuando se usa múltiples microscopio Simi laboratorio para el examen de sedimento urinario esto es de suma importancia que es u f o v sea el mismo porque los componentes en sedimento clínicamente significativos que se reportan como el número presente por campo de baja potencia por campo de alto poder
        Desafortunadamente la mayoría de los fabricantes de microscopios no gravan el número de campo en el ocular y si es necesario debe ser obtenido de la información de compra original midiendo el diámetro usando una regla y un objetivo 1 x o poniéndose en contacto con El fabricante
    2. 2 el total de ampliación de la muestra
14. Procedimiento de ajuste del microscopio
  1. Los microscopios clínicos hoy principalmente usan iluminación de kohler con ese tipo de iluminación la imagen de la fuente de luz enfocada sobre el plano focal frontal de la lente condensadora el diafragma de apertura por un condensador de lámpara localizado justo enfrente de la fuente de luz
  2. El uso adecuado de este sistema de iluminación es tan importante como la selección de un microscopio y sus objetivos
  3. Fabricante suministran instrucciones con el microscopio que son claras y fáciles de seguir además en línea están disponibles tutoriales interactivos que demuestran el rendimiento óptico mejorado de un microscopio cuando se ajusta para alcanzar la iluminación de kohler
  4. Es usuario debería revisar el ocular y los objetivos especialmente el objeto para aceite de inmersión para asegurarse de estos estén limpios y libres de aceite y huellas dactilares
  5. De forma rutinaria inspeccionar en microscopio y superficies ópticas antes de los ajustes se puede ahorrar tiempo valioso en la configuración en microscopio y en resolución de problemas
  6. En laboratorios en los cuales Todo el personal es el mismo microscopio inspeccionar antes ayuda identificar personas quienes necesitan que se les recuerda apropiado cuidado
  7. En laboratorios en los cuales Todo el personal es el mismo microscopio inspeccionar antes ayuda identificar personas quienes necesitan que se les recuerda apropiado cuidado y mantenimiento
15. Cuidado y mantenimiento preventivo
  1. El microscopio es un instrumento de precisión por lo tanto garantizar un rendimiento mecánico y óptico a lo largo plazo requiere de Cuidado incluyendo la limpieza y mantenimiento
  2. El polvo es probablemente el mayor causante de daño de los componentes mecánicos y ópticos del microscopio
  3. El uso de una cubierta de polvo para microscopio cuando éste no está en uso o colocándolo en un gabinete de almacenamiento elimina la acumulación de polvo
  4. El manejar el microscopio por ejemplo cuando le retiran de un gabinete almacenamiento cambia de área de trabajo de usuario debe siempre llevarlos firmemente usando ambas manos y debe evitar movimientos abruptos
  5. Todas las superficies ópticas Deben estar limpiadas para proporcionar imágenes nítidas y brillantes debido a que el revólver se el prota con la mano los objetivos están en peligro de mancharse con la grasa de la piel
  6. En microscopista nunca deben ser grasa tejido fascial o tejido sin pelusa para limpiar las superficies ópticas
  7. Después de usar el lente objetivo de inmersión en aceite microscopista debe remover el aceite cuidadosamente usando un papel seco para el ente debe repetir este procedimiento usando un papel humedecido con limpiador de lentes
  8. El microscopio se debe almacenar los objetivos de aceite de mención secos porque el aceite dejado sobre la superficie del ente puede perjudicar el rendimiento óptico de este
  9. El oculares es particularmente susceptible que se ensucie Especialmente cuando el usuario usa máscara singulares removido para limpieza se debe tener cuidado para prevenir la entrada de polvo en el tubo del microscopio y el asentamiento sobre la parte trasera de los lentes de objetivo
  10. Cuando la imagen de la muestra se visualiza con aberraciones visuales y se sospecha una lente sucia al siguiente procedimiento puede ayudar a identificar que la necesita atención
  11. La sustitución de la fuente de luz es fácil de realizar cuando se siguen las instrucciones del fabricante utilizar sólo lámparas de repuesto y señala El fabricante para asegurar la compatibilidad y el inicio de la Fuente de luz
Tipos de microscopio
1. Todos los tipos de microscopio Usan el mismo principio básico de amplificación utilizado en el microscopio de campo claro compuesto diferentes tipos de microscopio de contraste de fase de luz polarizada de contraste interferencia de campo oscuro y fluorescencia como su uso crece los diferentes tipos de microscopios se han vuelto cada vez más comunes
2. Microscopio de campo claro
  1. Microscopio de campo claro es el sistema de iluminación usado en Los microscopios más viejos y más comunes
  2. El nombre se refiere la apariencia oscura de la muestra contra un fondo brillante
  3. Ahora con eliminación de kholer gatos no se enfoca en el plano de la muestra pero sin el diafragma de apertura del condensador esto permite traer la iluminación uniforme de la muestra pesar del uso de una lámpara de filamento de bobina
3. Microscopio de contraste de fase
  1. en el laboratorio clinico microscopista encuentra componentes como índice refectorio bajo Qué son difíciles de visualizar sin teñir
  2. Con el microscopio de contraste de fase las variaciones en el índice refractivo se convierten en variaciones la intensidad de la luz o del contraste esto permite la visualización de componentes de baja reflectividad y células vivas ejemplo trichomonas
  3. La microscopio de fases se basa en la teoría ondulatoria de la Luz si las ondas de luz están en fase la intensidad de luz observada es la suma de todas las ondas individuales
  4. Si algunas ondas son retardadas la mitad de la longitud de onda se cancelará por completo una onda de luz no afectada lo que reduce la intensidad de la luz
  5. Los componentes retardan la luz a diferentes grados dependiendo de su forma única índice de refracción y las propiedades absorbencia. La conversión de microscopio de campo claro para una microscopía de contraste de fase requiere cambios en el condensador y en el objetivo
  6. El condensador debe ser equipado con un enfermo anular en el propio condensador o debajo de él. El Haz de iluminación puede pasar sólo a través de ese anillo limpio del diafragma antes de penetrar en la muestra
  7. El objetivo usado debe ser equipado con un elemento de Cambio de fase también representado nota que el elemento de Cambio de fase también se asemeja un objetivo
  8. Normalmente en un microscopio de campo claro Los Rayos de Luz no difractada y difractada son superpuestos para producir la ampliación de la imagen
  9. Estos rayos son recombinados produciendo diversos grados de contraste en imagen de la muestra áreas de la muestra parecen claras Y oscuras con halos de variaciones intensidades
  10. Cuando las muestras sin teñir son evaluados entidades con bajo índice refractivo son visualmente más a parientes que cuando se utiliza la microscopía de campo claro
4. Microscopio de luz polarizada
  1. La luz regular o no polarizada vibra en cada dirección perpendicular a su dirección de desplazamiento encontraste en las despolarizada vibra en una sola dirección o plano
  2. Cuándo la luz polarizada pasa a través de una sustancia opticamente activa esta se divide en dos haces una sigue la trayectoria original de la luz y la otra es rotada 90 grados
  3. El microscopio de luz polarizada tiene una amplia aplicación en el laboratorio clínico y en los productos farmacéuticos forense patologia geología y otros cambios
  4. Las sustancias necesitan sólo pequeñas diferencias en los índices de refracción para cambiar sensiblemente la rotación de la luz se conocen dos tipos de birrefringencia negativo i y positivo
  5. Si la sustancia opticamente activa gira el plano de luz polarizada hacia la derecha la sustancia tiene birrefringencia positiva
  6. Si la rotación es a la izquierda o en sentido contrario de las manecillas del reloj la sustancia tiene birrefringencia negativa
  7. Esta rotación óptica característica proporciona un medio de Identificar y distinguir las sustancias birrefringentes por ejemplo los cristales de urato monosódico exhiben birrefringencia negativa mientras que los cristales de pirofosfato cálcico son positivamente birrefringentes
  8. El convertir un microscopio de campo claro uno de luz polarizada requiere dos filtros un filtro llamado filtro de polarización que se coloca por debajo del condensador ya se ha colocado en un soporte por debajo del condensador o directamente sobre el puerto de iluminación y filtro señales se retira fácilmente
  9. El segundo filtro llamado El analizador está ubicado entre el objetivo y el ocular su orientación es tal que sólo puede pasar la luz que vibra en la dirección norte sur
  10. Muchas sustancias que se encuentran en las muestras de laboratorio clínico son birrefringentes algunos cristales analito químico y n clinican orina y otros tienen importancia clínica en el líquido sinovial y otras sustancias birrefringentes pueden ser encontrados debido a que otras sustancias pueden ser encontradas son necesarias asistencia técnica y capacitación para garantizar una correcta identificación
  11. Identificar un cristal sobre la base de la birrefringencia negativa positiva son usados un compensador de rojos de primer orden y una placa de onda completa
  12. La dirección de la vibración de los rayos lentos indica mediante una inscripción y en el compensador es la inscripción permite el microscopio historia entar paralelo y perpendicular la sustancia birrefringente al componente lento del Rayo para la observación de la birrefringencia característica de la sustancia
  13. En el laboratorio clínico Esta técnica microscopica es usada principalmente para exámenes microscópicos de orina y líquido sinovial para los estudios de la gota el uso del comenzar rojo predominan la diferenciación de cristales de urato monosódico y cristales de pirofosfato cálcico en líquido sinovial
5. Microscopio de contraste de interferencia
  1. 2 tipos de microscopía de contraste de interferencia son modulación de contraste Hoffman y la interferencia diferencial de contraste de nomarski
    1. Microscopio de modulación de contraste Hoffman
      1. Microscopía de modulación de contraste puede ser realizada con un microscopio de campo claro con 3 modificaciones
        1 una aventura especial de hendidura situada debajo del condensador
        2 un polarizador para el control del contraste está situado debajo de esta abertura de hendidura
        3 un filtro de amplitud especial llamado modulador está situada en la parte trasera del objetivo
        El principio básico de la microscopía de modulación de contraste se presenta esquemáticamente en las de la luz entre el polarizador llega a ser polarizada y pasa la abertura de rendija especial en el plano focal frontal del condensador
        Este pulverizador es giratorio esto logré variaciones de contraste y debido a que su apertura está cubierta parcialmente con un segundo polarizador de rotación no habrá variaciones en el contraste y la coherencia espacial
        Las modificaciones del microscopio hechos para modulación de contraste se encuentran en los mismos planos ópticos como el microscopio de contraste de fase
        La microscopio de interferencia diferencial de contraste puede producir imágenes de la muestra comparables con los vistos con modulación de contraste sin embargo debido a que la interferencia diferencial de contraste usa polarización para lograr imágenes tridimensionales cualquier sustancia birrefringente presenta en el plano de la muestra compromete la imagen
    2. Microscopio de interferencia diferencial de contraste nomarski
      1. Microscopio de interferencia diferencial de contraste las diferencias intensidad de la imagen de la muestra se cansan a través del uso de prismas de cristal birrefringente como divisores de Haz
        Al igual que con modulación de contraste al seleccionamiento óptico formación de imágenes capa por capa es posible debido a que la profundidad de foco es pequeña
        La conversión del microscopio de campo claro microscopía interferencia diferencial de contraste requiere
        1 un polarizador situado entre la fuente de luz y el condensador
        2 condensador especial que contiene un prisma de wollaston modificado por cada objetivo
        3 un prisma de wollaston situado entre el objetivo y el ocular
        La luz de iluminación llega a ser polarizada y entra en el condensador especial donde es dividida en dos haces
        Cuando se usa microscopio de interferencia diferencial de contraste en el fondo del fv puede cambiar de negro o gris oscuro a varios colores simplemente girando el prisma si todo después del objetivo
        Los fondos grises resultan imágenes tridimensionales más detalladas
  2. Microscopio de contraste interferencial microscopio convierten las diferencias una trayectoria óptica a través de la muestra a las diferencias de intensidad del imagen de la muestra. Ambas técnicas logran imágenes de la muestra de alto contraste y resolución sin a Los Superiores a los obtenidos con microscopio de contraste de fase
    1. No microscopio de contraste interferencial es excelente por la visualización detallada demuestra sin teñir su visualización superior de todos los componentes incluyendo células vivas y sustancias de bajos índices refractivos lo hacen particularmente Útil para exámenes microscópicos de preparaciones húmedas
6. Microscopio de campo oscuro
  1. Como su nombre implica la microscopía de campo oscuro produce una imagen demuestra brillante contra un fondo oscuro con negro
    1. En el laboratorio clínico este método sólo se utilizan las muestras no teñidas y es la técnica preferida para la identificación de espiroquetas. Cuando la luz pasa a través de la muestra reflexionó y fracción da lugar a la luz que entra en el objetivo
      1. Microscopio de campo oscuro es un medio económico de obtener aumento de contraste para facilitar la visualización de detalles de la muestra la técnica es beneficiosa en aclarar los bordes sin límites pero no es tan buena como la microscopía de contraste de fase Hola microscopio de contraste de interferencia en revelar detalles estructurales internos
        La ventaja del condensador de inversión es la habilidad de ser objetivos de alto y por lo tanto lograr mayor amplificación y resolución de la muestra. Por diseño de microscopio de campo oscuro requiere fuentes de iluminación brillante ya que sólo pequeñas cantidades de luz llegan a la lente del objetivo
7. Microscopio de fluorescencia
  1. La microscopía de fluorescencia permite la visualización de sustancias fluorescentes. La luz de una longitud de onda seleccionada se presenta a la muestra
    1. Si una muestra fluorescente especifique está presente en la muestra a continuación la luz es absorbida y emitida a una longitud de onda diferente y mayor cualquier luz emitida es transmitida al ocular para la visualización
      1. El primer filtro llamado filtro de exitación selecciona la longitud de onda de la luz de situación presentada a la muestra. El segundo filtro llamado barreiro filtro de emisión selecciona una longitud de onda específica de la luz emitida en la muestra
        Mientras que algunas sustancias biologicas son naturalmente fluorescentes la mayoría de las aplicaciones de Esta técnica requieren atención de la muestra con colorantes fluorescentes llamados fluoróforos
        Cada flor o flor o tiene una única multitud de onda de excitación y emisión En consecuencia los filtros seleccionados varían con fluoróforo usado en el procedimiento
        2 tipos de sistemas de iluminación que se diferencian en la trayectoria de la luz de exitación y están disponibles para la microscopio de fluorescencia
        Encontraste la luz de excitación en el sistema de luz reflejada se presenta la muestra desde arriba a través de la lente de objetivo. La microscopía de fluorescencia reflejada es actualmente el método de elección sus fuentes de iluminación variantes de lámparas halógenas de cuarzo al lámparas de arco de xenón o Mercurio
        La microscopía de fluorescencia sensible a pequeñas cantidades de fluoroforos presentes en los anticuerpos antígenos virus o cualquier otra entidad con la cual ellos quieren hacer Asociados
        En resumen numerosas técnicas microscópicas están disponibles y el método seleccionado depende de varios factores Obviamente el tipo de muestra juega un papel importante en la determinación de la técnica microscopica usada
        La capacidad para producir una imagen tridimensional en la sección de una muestra ópticamente puede no ser necesaria en algunas aplicaciones cada característica juega un papel importante en la selección de un microscopio para adaptarse a las necesidades de cada laboratorio

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