Diagnóstico serológico

Diagnóstico serológico

1. Anticuerpos

   • Herramientas sensibles y específicas
     • Detectar, cuantificar e identificar antígenos
       • Virus
       • Bacterias
       • Parásitos
     • Obtención en suero
       • Humanos
       • Animales
   • Policlonales
     • Heterogéneos
       • Reconocer numerosos epítopos en un único antígeno
   • Monoclonales
     • Reconocen epítopos individuales en un antígeno
     • Revolución de la inmunología
       • Identificación
         • Subpoblaciones de linfocitos CD4 y CD8
         • Antígenos de superficie de células linfocíticas
     • Obtención
       • Productos de células hibridas
         • Generan un hibridoma
           • Fusión de células esplénicas y células mielomatosas
           • Fábrica de una molécula de anticuerpo monoclonal
       • Ingeniería genética
         • Humanización para uso terapéutico

2. Métodos de identificación

   • Complejo antígeno-anticuerpo
     • Precipitación
     • Marcaje con una sonda radiactiva, fluorescente o enzimática
     • Indirectamente
       • Fijación del complemento

3. Técnicas de precipitación e inmunodifusión

   • ELISA y radioinmunoanálisis
     • Cuantificación de antígenos y anticuerpos
   • Western blot
     • Detección de anticuerpos específicos de antígenos
   • Inmunofluorescencia y enzimoinmunoanálisis
     • Detección y localización de antígenos
   • Inmunodifusión doble de Ouchternoly
     • Antígenos micóticos
       • Blastomyces
     • Determinar relaciones existentes entre diferentes antígenos
     • Determinación en muestras
       • Son diferentes
       • Comparten epítopos pero no todos, "identidad parcial"
       • Son idénticos
   • Inmunodifusión radial simple
     • Detectar y cuantificar un antígeno
   • Separación del antígeno por electroforesis en agar
     • Inmunoelectroforesis
     • Electroforesis en cohete
     • Contrainmunoelectroforesis
   • Fijación del complemento
     • Cuantificación del título de anticuerpos específicos
   • Inhibición de la hemaglutinación
     • Título de anticuerpos antivíricos; serotipo de cepa vírica
   • Aglutinación con látex
     • Cuantificación y detección de antígenos y anticuerpos
   • Zona de equivalencia
     • Naturaleza multivalente de las moléculas de anticuerpo

4. Inmunoanálisis para antígenos asociados a células (inmunohistología)

   • Antígeno en el interior o superficie de la célula
     • Detección
       • Biotina
         • Afinidad a moléculas de avidina o estreptovadina
           • Uso
             • Biopsias tisulares, células sanguíneas y de cultivo
       • EIA
         • Peroxidasa del rábano o fosfatasa alcalina
           • Conjugado con el anticuerpo produce un cromoforo
       • Citometría de flujo
         • Identificación de linfocitos "inmunofenotipificación"
         • Inmunofluoresencia de células en suspensión
       • Inmunofluorescencia
         • Indirecta
           • Uso de un segundo anticuerpo fluorescente, específico para el anticuerpo primario
         • Directa
           • Unión de molécula fluorescente a un anticuerpo

5. Inmunoanálisis para anticuerpos y antígenos solubles

   • Western blot
     • Confirmación de resultados de prueba ELISA en VIH
     • Variante de ELISA
     • Separación de proteínas por electroforesis según su peso molecular o carga
     • Muestra de proteínas reconocidas por el suero del paciente
   • ELISA
     • Modalidad
       • Forma de capturar el anticuerpo o antígeno
     • Detección
       • Uso de un anticuerpo antihumano unido a una enzima
         • Cuantificación por espectrofotometría
         • Peroxidasa del rábano picante o fosfatasa alcalina
     • Emplea un antígeno inmovilizado a una superficie
       • Capturar un anticuerpo específico en el suero de un paciente
     • Cuantificación de antígeno soluble
       • Prueba de embarazo
   • Análisis de inhibición
     • Neutralización
     • Hemaglutinación
   • Fijación del complemento
     • Prueba serológica estándar
     • Análisis del complemento residual
       • Lisis de los eritrocitos
   • Radioinmunoanálisis RIA
     • Uso de marcadores con sondas radiactivas I125
       • Cuantificación antígeno anticuerpo
     • Tipos
       • Análisis de captura
       • Análisis de competencia
   • Aglutinación en látex
     • Detección de antígeno o anticuerpo soluble
       • Los anticuerpos específicos de un virus provocan la agrupación de las partículas de látex cubiertas del antígeno

6. Serología

   • Identificar virus y agentes difíciles de aislar
   • Datos serológicos de una infección
     • Tipo y título de los anticuerpos e identidad de las células dianas antigénicas
   • Identificar un agente causal de la infección
   • Determinar la naturaleza de una infección
   • Evaluar la evolución de una infección
     • Lentas o crónicas
       • Hepatitis B
     • Seroconversión
       • Aumento de al menos 4 veces el título de anticuerpos en los sueros obtenidos en las fases aguda y de convalecencia
       • Producción de anticuerpos como respuesta a la infección primaria
         • IgM