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IDENTIFICACIÓN DE COCOS GRAM NEGATIVO (-)

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AUTORES: ANDREA ASQUI - STALIN BARRAGÁN
Andrea Carolina Asqui Quezada
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Andrea Carolina Asqui Quezada
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IDENTIFICACIÓN DE COCOS GRAM NEGATIVO (-)
  1. Las bacterias gramnegativas se tiñen de color rosado están encerradas en una cápsula protectora. Esta cápsula ayuda a evitar que los glóbulos blancos (que combaten las infecciones) ingieran las bacterias. Bajo la cápsula, las bacterias gramnegativas tienen una membrana externa que las protege contra ciertos antibióticos, como la penicilina.
    1. AEROBIOS
      1. Son bacterias que pueden crecer y vivir cuando hay oxígeno presente.
        1. OXIDASA
          1. El sistema NADPH oxidasa es un complejo multiproteico encargado de producir especies reactivas del oxígeno (ROS, por reactive oxygen species) en diferentes células y tejidos.
            1. ¿Para que sirve?
              1. Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidación del citocromo el cual es reducido por el oxígeno molecular produciéndose agua o peróxido de hidrógeno según la especie bacteriana
              2. ¿Cómo se hace la prueba de la oxidasa?
                1. Prueba en portaobjetos: humedecer el disco de Oxidasa con una gota de agua y luego colocar sobre este una colonia del microorganismo en estudio. Incubación A temperatura ambiente, durante 1 minuto. Positivo: observación de color rosado a fucsia en el disco y/o solución.
              3. POSITIVA (+)
                1. FERMENTACIÓN DE GLUCOSA
                  1. POSITIVO(+)
                    1. Neisseria
                      1. La Neisseria gonorrhoeae o gonococo es una bacteria Gram-negativa, oxidasa positiva, aeróbica, nutricionalmente fastidiosa, que microscópicamente aparece como diplococos. Los humanos son los únicos hospedadores naturales del gonococo, el cual se transmite por vía sexual.
                        1. MEDIO DE CULTIVO Thayer-Martin
                          1. El Agar Thayer Martin preparado con medio base GC, y adicionado de suplementos nutricionales, hemoglobina e inhibidores, permite obtener un buen desarrollo de Neisserias patógenas tales como N. gonorrhoeae y N. meningitidis.
                            1. ¿Cómo se prepara Thayer-Martin?
                              1. Pesar 8,2 gr del medio GC deshidratado y suspender en 100 ml. Agregar 1 gr de agar-agar y adicionar 0,3 gr de glucosa. Mezclar y hervir por 1 minuto con agitación frecuente para disolver en su totalidad. Esterilizar la mezcla en autoclave a 121°C por 15 minutos.
                            2. CRECIMIENTO
                              1. ONPG
                                1. Prueba rápida que permite diferenciar entre microorganismos fermentadores lentos de lactosa y no fermentadores.
                                  1. ¿Cómo se prepara ONPG?
                                    1. Colocar en baño María a 37ºC y agregar 1 disco de ONPG. Agitar el tubo teniendo la precaución de que el disco quede sumergido en la suspensión. Observar el cambio de color de la suspensión al cabo de 4 horas. Un color de amarillo suave al amarillo intenso indica una reacción positiva de ONPG.
                                  2. POSITIVO(+)
                                    1. FERMENTACIÓN DE MALTOSA
                                      1. POSITIVA (+)
                                        1. N. meningitidis
                                          1. Neisseria meningitidis o meningococo es una bacteria Gram-negativa, oxidasa-positiva, aeróbica, que microscópicamente aparece como diplococos.
                                        2. NEGATIVA (-)
                                          1. N. gonorrhoeae
                                          2. La maltosa es un disacárido (2 unidades de glucosa). Todas las levaduras cerveceras de Fermentis son seleccionadas por su alta actividad maltopermeasa, que transportan la maltosa desde el mosto al citosol, a través de su membrana celular.
                                        3. NEGATIVO(-)
                                          1. N. lactámica
                                            1. Bacteria diplococo gramnegativa. Es estrictamente una especie comensal de la nasofaringe.
                                      2. NO CRECIMIENTO
                                        1. Otras especies
                                        2. MEDIO DE CULTIVO AGAR CHOCOLATE
                                          1. Pasteurella
                                            1. Haemophilus
                                              1. H. influenzae
                                                1. Espectro patógeno
                                                  1. Cápsulacontiene fosfato de polirribitol, proteasa IgA1
                                                2. H. Aegytus
                                                  1. Espectro patógeno
                                                    1. Proteasa de IgA
                                                  2. H. Ducreyi
                                                    1. Espectro patógeno
                                                      1. Lipopolisacáridos A1 y A2
                                                  3. P. multocida
                                                    1. Espectro patógeno
                                                      1. Cápsula de polisacárido compuesta por ácido hialurónico
                                                  4. Agar Chocolate es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo. Es una variante del agar sangre. Contiene glóbulos rojos que han sido lisados por el suave calentamiento a 56 °C. Este agar se usa para el delicado y exigente crecimiento de bacterias respiratorias, como por ejemplo Haemophilus influenzae.
                                                    1. Preparación de Agar Chocolate:
                                                      1. Agregar 5-10 % de sangre ovina desfibrinada estéril (Britasheep) al medio esterilizado, fundido y enfriado a 45-50 ºC. Calentar a 80 ºC durante 10 minutos mez- clando frecuentemente. Dejar enfriar a 45-50 ºC y distribuir en pla- cas de Petri estériles.
                                            2. NEGATIVO (-)
                                              1. CATALASA POSITIVO (+)
                                                1. COCOS NO EXIGENTES
                                                  1. Branhamella
                                                    1. Bacteria gram negativa, aeróbica, oxidasa positiva con forma de diplococos que puede colonizar y causar infección del tracto respiratorio en humanos.
                                              2. La fermentación es otra vía anaeróbica (no que requiere oxígeno) para degradar la glucosa, esta se realiza en muchos tipos de células y organismos. En la fermentación, la única vía de extracción de energía es la glucólisis, con uno o dos reacciones extras al final.
                                                1. ¿Cómo se realiza el proceso de fermentación?
                                                  1. La fermentación es un proceso que degrada moléculas para transformarlas en otras moléculas más simples. En la elaboración del pan las levaduras transforman el almidón (un azúcar complejo) en glucosa. Lo hacen mediante la enzima amilasa (otras enzimas: glucosidasas y amiloglucosidasas)
                                            3. NEGATIVA (-)
                                              1. Acinetobacter
                                                1. Son bacilos o cocobacilos gram negativos, muchas veces dispuestos en parejas. No fermentan la glucosa y son aerobios estrictos, inmóviles, catalasa positivos y oxidasa negativos.
                                          2. ANAEROBIOS
                                            1. Las bacterias anaerobias son microorganismos que son capaces de sobrevivir y multiplicarse en ambientes que no tienen oxígeno.
                                              1. Veillonella
                                                1. Las veillonellas son cocos gram-negativos anaerobios asociados con salud oral. Para su aislamiento, se han reportado diferentes medios de cultivo. Las colonias de Veillonella spp. producen fluorescencia roja visible con luz ultravioleta, que desaparece en contacto con oxígeno.

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