Técnicas básicas de Microbiología Observación
de bacterias
Existen diferentes procedimientos y
tecnicas por las cuales podemos ver de
manera directa a las bacterias
Las bacterias, pueden observarse
directamente al microscopio de campo
claro.
MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA
Una alternativa para la observación
bacteriana es la microscopía de fluorescencia.
El microscopio de fluorescencia es un
microscopio óptico capaz de iluminar la muestra
con una luz.
Cuya longitud de onda puede variar debido a
su paso por un filtro de excitación.
MICROSCOPÍA CONFOCAL
La microscopía confocal tiene varias ventajas sobre la microscopía óptica
convencional, como son; su mayor contraste y elevada resolución,
especialmente en aquellas células marcadas con fluorescencia.
La tinción es un método sencillo para incrementar el
contraste entre la célula y su entorno y por lo tanto
contribuye a mejorar la imagen observada.
Todas las tinciones se realizan a partir de suspensiones de
microorganismos extendidas en un portaobjetos
La fijación, procedimiento que permite preservar
estructuras celulares, se puede llevar a cabo con
quimicos o calor
La fijación por calor es la más
utilizada para la observación de
bacterias.
Este procedimiento consiste en pasar
el portaobjetos, con la suspensión
bacteriana extendida y seca, a través
de una llama de un mechero.
La fijación química con agentes como etanol,
folmaldehido y ácido acético entre otros
muchos, se utiliza para preservar las
estructuras celulares.
Tinción negativa
Tinción simple
TINCIÓN DIFERENCIAL
Tinción de Gram
Tinción de
ácido-alcohol
resistencia
OBSERVACIÓN “IN VIVO”
Método de la gota pendiente
Este procedimiento es la forma más
sencilla de observación de organismos
vivos
Nos proporciona información sobre la morfología,
tamaño, color y movilidad de las bacterias.
Método de observación directa en
contraste de fases o interferencia
diferencial
En este caso la suspensión de microorganismos se observa con
un microscopio de contraste de fases o interferencia
diferencial (DIC) que permiten el aumento del contraste.
El microscopio de interferencia
diferencial permite la observación
tridimensional de la muestra