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Description
Mind Map by Evelin Zambrano, updated more than 1 year ago
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Created by Evelin Zambrano
about 5 years ago
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Microtomía
- El micrótomo es un equipo mecánico de precisión que se
utiliza para realizar cortes en tejidos que han sido objeto de
inclusión en parafina, siendo las secciones conseguidas de
espesor micrométrico lo suficientemente delgadas para
permitir su examen por el microscopio.
- Normalmente los micrótomos modernos permiten cortes de
un espesor de 0,1 hasta 100 µm. A modo comparativo: El
cabello humano tiene un espesor entre 50 y 70 µm.
- Los primeros micrótomos, tal como hoy en día los
conocemos, se desarrollaron en 1770. Con estos se
podía fijar la prueba y ajustar el grosor del corte
mediante unos tornillos.
- Los primeros micrótomos, tal como hoy en día los
conocemos, se desarrollaron en 1770. Con estos se
podía fijar la prueba y ajustar el grosor del corte
mediante unos tornillos.
- Normalmente los micrótomos modernos permiten cortes de
un espesor de 0,1 hasta 100 µm. A modo comparativo: El
cabello humano tiene un espesor entre 50 y 70 µm.
- La microtomía, es; en parte una técnica y en parte un arte.
- ¿Qué tipo de cuchillas tienen los micrótomos?
- Las cuchillas que utilizan los micrótomos pueden ser de tres tipos de
materiales, los cuales dependen de la necesidad que el laboratorio
necesite cubrir y de la finura del corte que requieran las secciones.
- Cuchillas de acero: Las cuchillas de acero para micrótomos son especiales para
cortar secciones de tejidos blandos de animales y/o vegetales. Las cuchillas de
acero pueden utilizarse en histología, corcho, madera y poliestireno expandido
para microscopía de luz.
- Cuchillas de vidrio: Las cuchillas de vidrio para micrótomos son
ideales para extraer secciones muy delgadas para microscopía de
luz y electrónica.
- Cuchillas de diamante: Las cuchillas de diamante para
micrótomos generalmente se utilizan en las industrias, pues
éstas se utilizan para cortes finos de materiales duros como
huesos, dientes y materia vegetal como, maderas duras, pues
además son ideales para microscopía de luz como y
electrónica.
- Las cuchillas que utilizan los micrótomos pueden ser de tres tipos de
materiales, los cuales dependen de la necesidad que el laboratorio
necesite cubrir y de la finura del corte que requieran las secciones.
- Tipos de micrótomos
- Micrótomos semiautomáticos
- Los micrótomos semiautomáticos están diseñados para el corte automatizado y motorizado de
muestras. Es ideal para laboratorios de análisis de rutina y de investigación en histología así como
para el control de calidad en industrias.
- Los micrótomos semiautomáticos están diseñados para el corte automatizado y motorizado de
muestras. Es ideal para laboratorios de análisis de rutina y de investigación en histología así como
para el control de calidad en industrias.
- Micrótomos automáticos
- El micrótomo automático está diseñado para el corte de muestras en parafina, es fácil de operar, por
lo tanto, permite al usuario poder hacer otras tareas mientras se encuentra en operación.
- El micrótomo automático está diseñado para el corte de muestras en parafina, es fácil de operar, por
lo tanto, permite al usuario poder hacer otras tareas mientras se encuentra en operación.
- Criostatos o Micrótomo de congelación
- Garantizan el procesamiento eficaz de las muestras, facilitando a su vez cortes rápidos, seguros y
reproducibles. Las espaciosas cámaras crióstáticas tipo "opentop", todas construidas en acero
inoxidable, permiten un trabajo cómodo y ofrecen amplio espacio para el almacenamiento se
muestras.
- Garantizan el procesamiento eficaz de las muestras, facilitando a su vez cortes rápidos, seguros y
reproducibles. Las espaciosas cámaras crióstáticas tipo "opentop", todas construidas en acero
inoxidable, permiten un trabajo cómodo y ofrecen amplio espacio para el almacenamiento se
muestras.
- Ultramicrótomo
- Con los Ultramicrótomo se preparan muestras para los microscopios electrónicos de transmisión.
Debido a que los preparados deben ser extremadamente finos, estos micrótomos disponen de
cuchillas especiales y de un avance muy fino, que frecuentemente es accionado por dilatación
térmica.
- Con los Ultramicrótomo se preparan muestras para los microscopios electrónicos de transmisión.
Debido a que los preparados deben ser extremadamente finos, estos micrótomos disponen de
cuchillas especiales y de un avance muy fino, que frecuentemente es accionado por dilatación
térmica.
- Micrótomo de deslizamiento
- Estos micrótomos se componen de un sujeta-muestras fijo y una cuchilla que está fijada sobre una
corredera. Para garantizar un corte estable, normalmente las correderas de los micrótomos suelen
pesar bastante.
- Estos micrótomos se componen de un sujeta-muestras fijo y una cuchilla que está fijada sobre una
corredera. Para garantizar un corte estable, normalmente las correderas de los micrótomos suelen
pesar bastante.
- Micrótomo de oscilación
- Micrótomo de rotación Universal
- El micrótomo de rotación universal está diseñado para las aplicaciones de rutina y se destaca por
diversas innovaciones y mejoras técnicas, entre otros un nuevo sistema de movimiento del volante
que implica mayor precisión en el corte.
- Cuenta con una rotación de la muestra de 180º y no necesita lubricación y mantenimiento constante,
pues el volante se puede bloquear en cualquier posición, y el mango se puede bloquear en la posición
más alta, lo que suele ser muy seguro para cambiar la hoja o la muestra. -Operación: Manual -Rango
de espesor del corte: 0- 60 μm
- PARTES
- El panel de
mandos
- Con teclas de colores y en relieve. Con la práctica, estas
características permiten el manejo prácticamente ‚ciego‘ del panel
permitiendo al usuario enfocar toda su atención en el corte y en
recoger las muestras. El panel de mandos es ajustable en inclinación
y puede ser posicionado a la izquierda o a la derecha del equipo.
- Con teclas de colores y en relieve. Con la práctica, estas
características permiten el manejo prácticamente ‚ciego‘ del panel
permitiendo al usuario enfocar toda su atención en el corte y en
recoger las muestras. El panel de mandos es ajustable en inclinación
y puede ser posicionado a la izquierda o a la derecha del equipo.
- El portacuchillas
- Con protector de dedos ideal: si se usa según lo previsto, el
protector integrado reduce prácticamente a cero la posibilidad de
dañarse con el filo de la cuchilla. El protector de dedos puede
permanecer colocado encima del filo también durante el corte.
- Con protector de dedos ideal: si se usa según lo previsto, el
protector integrado reduce prácticamente a cero la posibilidad de
dañarse con el filo de la cuchilla. El protector de dedos puede
permanecer colocado encima del filo también durante el corte.
- Inferior número de palancas de fijación
- Que en cualquier otro microtomo actualmente en el mercado aseguran facilidad de manejo.
- Que en cualquier otro microtomo actualmente en el mercado aseguran facilidad de manejo.
- Amplia zona de
almacenamiento
- La bandeja integrada da espacio para tener siempre a mano todas las herramientas
auxiliares. Para el mantenimiento de las muestras en frío junto al equipo
recomendamos la bandeja de refrigeración extraíble (accesorio opcional)
- La bandeja integrada da espacio para tener siempre a mano todas las herramientas
auxiliares. Para el mantenimiento de las muestras en frío junto al equipo
recomendamos la bandeja de refrigeración extraíble (accesorio opcional)
- El ajuste lateral de portacuchillas
- permite aprovechar el filo entero de la cuchilla sin tener que aflojar el mecanismo de sujeción de la
misma. Esto ahorra costos, sobre todo en laboratorios que cortan grandes cantidades de bloques.
Tres posiciones de encaje predefinidas (izquierda, centro, derecha) corresponden a la anchura de un
típico cassette estándar.
- permite aprovechar el filo entero de la cuchilla sin tener que aflojar el mecanismo de sujeción de la
misma. Esto ahorra costos, sobre todo en laboratorios que cortan grandes cantidades de bloques.
Tres posiciones de encaje predefinidas (izquierda, centro, derecha) corresponden a la anchura de un
típico cassette estándar.
- El panel de
mandos
- PARTES
- El micrótomo de rotación universal está diseñado para las aplicaciones de rutina y se destaca por
diversas innovaciones y mejoras técnicas, entre otros un nuevo sistema de movimiento del volante
que implica mayor precisión en el corte.
- Micrótomos rotatorios
- Micrótomos rotatorios manuales
- Micrótomos semiautomáticos
- Errores en microtomía Problemas y
soluciones
- Pesca,
Desparafinización
- BAÑO DE FLOTACIÓN
- Están constituidos por un tanque fabricado en material inoxidable, el cual tiene montado en la parte
inferior del mismo un conjunto de resistencias eléctricas mediante los cuales transfieren calor a un
medio como agua o aceite, que se mantiene a una temperatura preseleccionando a través de un
dispositivo de control.
- Se pone en agua a 47°C aproximadamente, se pone en un portaobjetos y se añade alcohol, gelatina
sin sabor, goma para extender y deslizar el tejido, ya deslizado este se levanta y se coloca sobre una
laminilla, entonces se pasa a la desparafinacion sobre una platina o estufa a más de 60°C-70°C para
pasar luego a la tinción.
- Los cortes se extienden al depositarlos sobre la superficie del líquido ex tendedor contenido en un
recipiente Esto impide que se formen facetas desiguales en el filo de la denominado “baño de
flotación” (éste mantiene la navaja produciéndose, con ello, un afilado deficiente. temperatura entre
40o a 45o C).
- Las secciones se extienden aisladas o formando cintas, estas se recogen y adhieren al portaobjetos
de la misma forma: en el caso que se requiere recoger los cortes aislados, extendido previamente
como una cinta, deben separarse utilizando las mismas pinzas finas o agujas de disección.
- Están constituidos por un tanque fabricado en material inoxidable, el cual tiene montado en la parte
inferior del mismo un conjunto de resistencias eléctricas mediante los cuales transfieren calor a un
medio como agua o aceite, que se mantiene a una temperatura preseleccionando a través de un
dispositivo de control.
- PROCESO DE PESCA
- Este proceso consiste en que el corte de tejido se transporta hacia el baño de flotación con agua, el
cual se encuentra a una temperatura de entre 45 y 50ºC donde, gracias a las fuerzas de tensión
superficial que se generan en la lámina de parafina y tejido al hacerla flotar sobre el líquido, se
eliminan posibles pliegues.
- El procedimiento para recuperar los mejores cortes del baño se denomina coloquialmente “pesca” y
consiste en introducir un portaobjetos en el baño hasta tocarla sección en uno de los lados del corte.
- Cuando empieza la adherencia de la sección sobre el cristal se extrae poco a poco el portaobjetos del
baño, dejando drenar el agua por gravedad. Si la orientación o la disposición del corte no es la
adecuada, éste se puede volver a reflotar y orientar.
- Al terminar el montaje de las preparaciones vaciamos el baño y eliminamos cualquier vestigio de
contaminación con papel de filtro.
- Una vez montados los cortes sobre el porta, y antes de la tinción, las preparaciones deben ser
secadas meticulosamente para evitar su desprendimiento.
- Estos e hace metiendo la preparación en la estufa a 60ºC durante 10/20 minutos, o a 37ºC durante 24
horas. Una temperatura elevada (valores próximos a 100ºC, como suelen hacer algunos técnicos de
mayor edad) puede deteriorar de forma irreversible la mayor parte de los componentes bioquímicos
y antígenos tisulares.
- Estos e hace metiendo la preparación en la estufa a 60ºC durante 10/20 minutos, o a 37ºC durante 24
horas. Una temperatura elevada (valores próximos a 100ºC, como suelen hacer algunos técnicos de
mayor edad) puede deteriorar de forma irreversible la mayor parte de los componentes bioquímicos
y antígenos tisulares.
- Una vez montados los cortes sobre el porta, y antes de la tinción, las preparaciones deben ser
secadas meticulosamente para evitar su desprendimiento.
- Al terminar el montaje de las preparaciones vaciamos el baño y eliminamos cualquier vestigio de
contaminación con papel de filtro.
- Cuando empieza la adherencia de la sección sobre el cristal se extrae poco a poco el portaobjetos del
baño, dejando drenar el agua por gravedad. Si la orientación o la disposición del corte no es la
adecuada, éste se puede volver a reflotar y orientar.
- El procedimiento para recuperar los mejores cortes del baño se denomina coloquialmente “pesca” y
consiste en introducir un portaobjetos en el baño hasta tocarla sección en uno de los lados del corte.
- Este proceso consiste en que el corte de tejido se transporta hacia el baño de flotación con agua, el
cual se encuentra a una temperatura de entre 45 y 50ºC donde, gracias a las fuerzas de tensión
superficial que se generan en la lámina de parafina y tejido al hacerla flotar sobre el líquido, se
eliminan posibles pliegues.
- DESPARAFINACIÓN
- Después de extender y montar el corte en una laminilla el corte debe ser secado para evitar su
desprendimiento y desparafinar los cortes, la desparafinación se lleva acabo introduciendo las
laminillas acomodadas en una canastilla de portaobjetos, a la estufa a una temperatura de 60ºC por
30 minutos
- antes de colorear, porque los colorantes son hidrofílicos. Lo paso
por xileno (desparafinado) y luego por concentraciones decrecientes
de alcohol (rehidratación)
- Después de extender y montar el corte en una laminilla el corte debe ser secado para evitar su
desprendimiento y desparafinar los cortes, la desparafinación se lleva acabo introduciendo las
laminillas acomodadas en una canastilla de portaobjetos, a la estufa a una temperatura de 60ºC por
30 minutos
- BAÑO DE FLOTACIÓN
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