Cultivos celulares

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Iván Carrascal
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Iván Carrascal
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Cultivos celulares
  1. Un cultivo celular es el conjunto de procedimientos que hacen posible el mantenimientos células pluricelulares en un ambiente controlado preservando al máximo sus características fisiológicas, bioquímicas y genéticas
    1. Tipos de cultivos celulares
      1. Cultivos de explantes
        1. Consiste en pegar un fragmento de tejido a una superficie y nutrirlo con un medio de cultivo
        2. Cultivos de órganos
          1. Consiste en mantener un órgano entero o parte de él con los distintos tipos celulares presentes diferenciados, así como la estructura histológica y la arquitectura del órgano
          2. Cultivos de células
            1. Se realiza a partir de suspensiones celulares que se introducen en un recipiente adecuado junto con un medio de cultivo y se incuban en las condiciones óptimas para que las células crezcan
              1. Cultivo celular primario
                1. La suspensión celular de partida se obtiene separando las células de un tejido por métodos mecánicos o enzimáticos
                2. Cultivo celular secundario
                  1. La suspensión celular se obtiene a partir d un cultivo primario o de otro secundario, mediante un subcultivo o "pase"
            2. Principales aplicaciones
              1. Estudios de citoxidad
                1. Estudios de cardiogénesis
                  1. Estudio de cualquier aspecto relacioado con el metabolismo celular
                    1. Estudios con células madre
                      1. Virología
                        1. Inmunología
                          1. Producción de fármacos
                            1. Producción de tejidos y órganos funcionales en un ambiente controlado para su uso en injertos y traspantes
                              1. Estudios de mutagénesis
                              2. Factores que intervienen en el cultivo
                                1. Soporte físico
                                  1. Materiales empleados
                                    1. Tipos de recipiente
                                      1. Placas multipocillo
                                        1. Placas de Petri
                                          1. Frascos roux
                                            1. Botellas para incubadores tipo roller
                                            2. Tratamiento de recipientes
                                            3. Medios de cultivo
                                              1. Características fisicoquímicas de los medios
                                                1. pH
                                                  1. Osmolaridad
                                                    1. Viscosidad
                                                      1. Tensión superficial
                                                      2. Composición de los medios de cultivo
                                                        1. Tampón
                                                          1. Sales minerales
                                                            1. Glucosa
                                                              1. Aminácidos
                                                                1. Suero animal descompementado
                                                                  1. Suplementos orgánicos de bajo peso moecular
                                                                    1. Indicador Ph
                                                                      1. Antibióticos y antifúngicos
                                                                    2. Condiciones de incubación
                                                                      1. Temperatura
                                                                        1. Humedad
                                                                          1. Atmósfera gaseosa
                                                                        2. Procedimientos de cultivo celular
                                                                          1. 1) Disgregación celular
                                                                            1. 3) Recuento y viabilidad celular
                                                                              1. 2) Selección de células
                                                                                1. 4) Descongelación de células
                                                                                  1. 5) Siembra del cultivo
                                                                                    1. 6) Mantenimiento del cultivo
                                                                                      1. 7) Conservación de células
                                                                                      2. Contaminación en los cultivos
                                                                                        1. Crecimiento de los cultivos
                                                                                          1. Formas de crecimiento
                                                                                            1. En monocapa
                                                                                              1. Consiste en que las células crecen pegadas sobre una superficie sólida
                                                                                                1. En la fase de latencia se van pegando al soporte
                                                                                                  1. En la fase exponencial proliferan formando COLONIAS CELULARES
                                                                                                    1. En a fase estacionaria entran en CONFLUENCIA, estableciendo contacto entre ellas lo que produce INHIBICIÓN POR CONTACTO
                                                                                                  2. En suspensión
                                                                                                    1. Consiste en mantener células que no necesitan pegarse a una superficie para crecer, dispersas en el interior del medio de cultivo y creciendo
                                                                                                  3. Curva de crecimiento
                                                                                                    1. Es a representación grafica de a concentración de células por los días de cultivo en la que se diferencian tres fases:
                                                                                                      1. Fase de latencia
                                                                                                        1. Corresponde a las primeras 24 horas de evolución del cultivo, en as que no se produce crecimiento y el número de células permanece contstante o disminuye ligeramente
                                                                                                        2. Fase estacionaria
                                                                                                          1. Sucede a partir de los 6-7 días y es la fase en la que el número de células permanece constante
                                                                                                          2. Fase exponencial
                                                                                                            1. Dura aproximadamente 6-7 días y corresponde a la fase en la que el número de células aumenta de manera exponencial hasta alcanzar un máximo. Al final de esta fase es el mejor momento para realizar subcultivos
                                                                                                        3. Líneas celuares
                                                                                                          1. Línea celular primaria
                                                                                                            1. Es aquella obtenida a partir de un CULTIVO PRIMARIO y que se mantiene en cultivo mediante pases seriados durante un tiempo limintado
                                                                                                              1. Las líneas celulares primarias tienen una vida finita entre 20 y 100 pases y después entran en la FASE DE SENESCENCIA en la que las células van perdiendo capacidad dividirse y el cultivo acaba muriendo
                                                                                                            2. Línea celular continua
                                                                                                              1. Son aquellas que se obtiene a partir de un cultivo primario y se mantiene en cultivo por tiempo ilimitado mediante pases seriados
                                                                                                                1. Estas líneas celulares aparecen por la aparición de CÉLULAS IMORTALES, como consecuencia de un FENÓMENO DE TRANSFORMACIÓN de las células normales, que se puede inducir por:
                                                                                                                  1. Métodos físicos
                                                                                                                    1. Métodos químicos
                                                                                                                      1. Métodos biológicos
                                                                                                            Show full summary Hide full summary

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