Diagnóstico de Plasmodium: gota gruesa y Giemsa

Práctica 4. Diagnóstico de Plasmodium

Procedimientos

a) Gota gruesa

Tener todos los materiales listos.

Sangre con anticoagulante o gotas por punción

El dedo se sostiene enérgicamente y se pincha en forma rápida, la primera gota de sangre se deshecha.

Se utilizan dos portaobjetos.

Dejar secar las muestras por varias horas.

La gota gruesa deben colorearse a brevedad

b) Coloración de Giemsa (método de Walker)

Solución de trabajo un portaobjetos una gota de solución de Giemsa en 1 mL de solución amortiguadora.

Precoloración

1. Sumergir el portaobjetos durante un segundo en la solución de azul de etileno fosfatado.

2. Remover el exceso de azul enjuagando suavemente el portaobjetos en la solución amortiguadora

3.colorear inmediatamente o dejar secar.

Coloración

Colorear de 6 – 10 minutos.

B. El exceso se lava sumergiendo el portaobjetos en solución amortiguadora

con aceite de inmersión

Extendido

1. Observar los pasos 1 y 2 de gota gruesa.

Este extremo del extendido debe tener el grosor de una sola capa de eritrocitos. Dejar secar.

Coloración Giemsa

Solución de trabajo: se diluye la solución Giemsa 1:50 (para 45 min) o 1:20 (para 20 min) en solución amortiguadora

1. El extendido se fija extendiéndolo con 2-3 gotas de alcohol metílico y se deja secar

2. Colorear la lámina en plato cóncavo

3. Eliminar el exceso de colorante sumergiendo en la solución amortiguadora.

Con aceite de inmersión.

c) Revisión de preparaciones fijas con Plasmodium vivax

2. Mida, caracterice y dibuje a los parásitos.

Objetivo 10x posterior 100x

Observaciones Y resultados