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El proceso de Reacción en Cadena de la Polimerasa

JOSE ALBERTO MONTERO AMARIS Spanish

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El proceso de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
ADN DIANA+NUCLEOTIDOS+TAQ POLIMERASA+CEBADORES+SOLUCION BUFFER+AGUA MINERAL, TODO EN UN TUBO DE ENSAYO
DESNATURALLIZACION DEL ADN
SE ELEVA LA TEMPERATURA A 95°C
SE SEPARA LA DOBLE HELICE DEL ADN EN CADENAS SENCILLAS
TEMPLAR CEBADORES
SE BAJA LA TEMPERATURA ENTRE 50-60°C
SE UNEN LOS CEBADORES O PRIMERS A SECUENCIAS COMPLEMENTARIAS, SITUADAS EN LOS EXTREMOS 3´DEL ADN DIANA
EXTENSIÓN DE CEBADORES O PRIMERS
SE ELEVA LA TEMPERATURA A 72°C
LA TAQ POLIMERASA SINTETIZA LA CADENA COMPLEMENTARIA A PARTIR DEL PRIMERS, EN EL PRIMER CICLO SOBRE PASA LOS LIMITES DE LA SECUENCIA DIANA
SE REPITE EL CICLO, PARA OBTENER EL NUMERO DE MOLECULAS DE ADN POR DUPLICADO
COMO TODO ESTÁ EN EL TUBO DE ENSAYO, REINICIAMOS EL CICLO TANTAS VECES COMO SEA POSIBLE: CALENTAMOS, SE SEPARAN LAS CADENAS, ENFRIAMOS, SE ADHIEREN LOS CEBADORES, CALENTAMOS NUEVAMENTE, PARA QUE LA POLIMERASA ACTUE, SE OBTIENEN 2 CADENAS, LUEGO 3 Y ASÍ SUCESIVAMENTE
FIN