Tipos de microscopía

Tipos de microscopía

1. Existen dos tipos de microscopia

   • Ópticos
     • Microscopio de transparencia o de campo claro
       • Este microscopio se caracteriza porque emplea luz natural o luz artificial como energía luminosa para formar las imágenes del objeto que se observa. La imagen muestra puntos o áreas iluminadas sobre un fondo claro o transparente
         • Para que la imagen sea visible con nitidez es necesario que el objeto examinado este coloreado o teñido para que así sus componentes puedan ser contrastados
     • Microscopio de campo obscuro
       • Utiliza una luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El campo de visión del objetivo se encuentra en la zona hueca del cono de luz y sólo recoge la luz que se refleja en el objeto. Por ello los objetos minúsculos que se están analizando aparecen como una luz brillante sobre el fondo
         • Mediante el empleo de este microscopio se distinguen con facilidad la forma y el movimiento helicoidal que muestra la espiroqueta Treponema pallidum, una bacteria causante de la sífilis.
     • Microscopio de contraste de fases
       • Es el microscopio fotónico más utilizado para observar objetos o estructuras transparentes sin teñir.
         • Este tipo de microscopio es muy útil a la hora de examinar tejidos vivos y ciertas funciones que ellas puedan desarrollar (fagocitosis, mitosis, movimientos ameboideos, ciliares o flagelares, etc.) Por lo que se utiliza con frecuencia en biología y medicina.
     • Nomarski, microscopía diferencial de contraste de interferencia (DIC)
       • Utiliza dos rayos de luz polarizada y las imágenes combinadas aparecen como si la célula estuviera proyectando sombras hacia un lado
         • Este tipo de microscopios son utilizados para observar relieves de especimenes muy difíciles de manejar, es muy utilizado en los tratamientos de fertilización in-vitro actuales. DIC se usa cuando el espécimen es muy grueso para usar contraste de fases
     • Microscopía de fluorescencia
       • Una sustancia natural en las células o un colorante fluorescente aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía absorbida como rayas luminosas: esto se conoce como fluorescencia.
         • La condición esencial para que se produzca fluorescencia es que la longitud de onda de la energía radiante excitatoria sea menor que la longitud de onda emitida.
     • Microscopía confocal
       • Es un microscopio capaz de obtener imágenes tridimensionales de la célula. Se basa en un principio similar al de un microscopio de fluorescencia, pero se utilizan dos diafragmas confocales (uno antes de la muestra y otro después) capaces de enfocar la iluminación en un único punto de la muestra
         • Se utiliza un láser como fuente luminosa, y con él se va barriendo la muestra por todo su volumen, plano a plano, creando muchas imágenes bidimensionales que un ordenador interpreta, generando finalmente una imagen tridimensional del objeto.
   • Electrónicos
     • Microscopio electrónico de transmisión
       • Es un microscopio basado en la microscopía fotónica con la diferencia que no usa energía luminosa en cambio usa haces de electrones y en vez de lentes ópticas (de vidrio) usa “lentes” construidas mediante campos electromagnéticos.
         • Los electrones que atraviesan o son desviados por estructuras del espécimen que poseen escasa o nula densidad llegan a la pantalla fluorescente y estimulan sus partículas. Aquellos electrones que inciden en estructuras de mayor densidad, son reflejados o absorbidos, no las atraviesan y dejan zonas de la pantalla sin estimular, por lo tanto en esos lugares no se emite luminosidad. De esa manera se forma la imagen con zonas iluminadas o claras denominadas electronlúcidas, y otras oscuras o electrondensas
     • Microscopio electrónico de barrido
       • Este microscopio funciona con una fuente generadora de electrones, campos electromagnéticos que actúan como “lentes” concentradoras de los haces de electrones o como ampliadoras de imágenes. La diferencia con el microscopio de trnasmisión estriba en que los electrones no atraviesan el espécimen para formar las imágenes. Los electrones se aceleran y concentran hasta formar un haz sumamente delgado de mas o menos 5 nm de diámetro que rastrea o “barre” la superficie de la muestra
         • Este microscopio, ofrece imágenes con una resolución que alcanzan de 10 a 20 nm. El aumento efectivo es de 15,000 a 50,000 diámetros. Otra ventaja de este microscopio es que forma imágenes con una gran profundidad de foco; de aproximadamente 500 veces que la del microscopio fotónico. Esta propiedad le confiere a la imagen su aspecto tridimensional