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Biotecnologia
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Biotecnologia
Downstream
- Recuperação
- Fontes frequentes
- Escherichia coli
- Saccharomyces cerevisiae
- CHO
- Centrifugação
- Útil em suspensão de leveduras
- Aplicação de força para sedimentação de sólidos
- Cuidado com a viscosidade do filtrado
- Filtração
- Filtração Tangencial
- Menor acúmulo de sólidos
- Útil na clarificação de suspensão bacteriana
- Atenção!
- Verificar tamanho de poro da membrana
- Mais rentável e eficaz
- Filtração Convencional
- Observar viscosidade da suspensão
- [células na suspensão]
- Compressibilidade da torta
- Atenção!
- Formação de torta
- Filtração Tangencial
- Fontes frequentes
- Produção de proteína
- Meio intracelular
- Carece de lise celular
- Sonicação
- Tensoativos
- Enzimas
- Homogeneização a alta pressão
- E. coli
- Risco de liberação de endotoxinas
- Recuperação por Filtração ou Centrifugação
- Tem recuperação e purificação mais dificultosa
- Separar proteína de interesse de diversas
- Proteína forma corpos de inclusão citoplasmático
- Carece de lise celular
- Meio extracelular
- Recuperação facilitada
- Secreção em meio aquoso
- Purificação facilitada
- Interferentes pouco existentes
- Meio intracelular
- Concentração
- Ultrafiltração
- Aplicação de pressão
- Pistões
- N2
- Variadas membranas com tamanho de poros diferentes
- Aplicação de pressão
- Precipitação
- Polímeros não-iônicos
- Calor
- Polieletrólitos
- Solventes orgânicos
- Sais metálicos
- Salting-out
- Aumenta a concentração de sulfato de amônio
- Aglutinação das proteínas
- Precipitação de complexo protéico
- Aglutinação das proteínas
- Aumenta a concentração de sulfato de amônio
- Diálise
- Retém partículas de grande massa com membranas semipermeáveis
- Útil para eliminar contaminantes
- Peptídeos
- Tampão
- Sais, ect
- Derivados de celulose
- Ultrafiltração
- Purificação
- Cromatografia por Troca Iônica
- Separação usando interações eletrostática entra aminoácidos e fase estacionária
- Eluição
- Alteração do pH, em consequência, froça iônica
- Bioafinidade
- Muito específica
- Usa interação
- Anticorpo-antígeno
- Enzima-inibidor
- Lectina-glicose
- Exclusão
- Uso de géis na fase estacionária que formam poros
- Princípio: separação por tamanho e forma da partícula
- Aplicado como última etapa de purificação
- Adsorção
- Afinidade das partículas da fase móvel com a fase estacionária
- Muito utilizada
- Fase móvel
- Gradiente
- Fixa
- Vantagens
- Versátil
- Alta resolução
- Boa detectabilidade
- Análise relativamente rápida
- Desvantagens
- Custo de instrumentação
- Requer equipe treinada
- Custo elevado de operacionalização
- Cromatografia por Troca Iônica
- Formulação
- Adjuvantes
- Albumina
- Proteína de sacrifício
- Aminoácidos
- Açúcares
- Tensoativos
- Não iônicos
- Tween
- Poloxamer
- Polissorbato
- Filtração Esterilizante
- Salas Classe B e A
- Filtros de 0,22 um
- Processo asséptico
- Liofilização
- Solução congelada a -80°C
- Sublimação
- Utilização de crioprotetores
- Pó liofilizado é estável por mais tempo
- Vantagens
- Degradação inibida
- Fácil redispersão
- Produto leve
- Baixa oxidação
- Desvantagens
- Produto higroscópico
- Processo lento
- Custo elevado
- Armazenamento delicado
- Adjuvantes
- Recuperação
CARACTERIZAÇÃO
- Produto acabado
- Controle de Qualidade
- Determinação de Potência
- Bioensaio
- Fatores de Crescimento
- Incubação
- Células sensíveis
- Nucleotídeos marcados
- Incubação
- EPO
- Camundongos
- Radioatividade Hemoglobina
- Ferro radioativo
- Camundongos
- Interferons
- anti-viral
- Limitações
- Falta de precisão
- Tempo
- Custo
- Fatores de Crescimento
- Imunoensaio
- Precisão
- Anticorpos Monoclonais
- HRP
- TMB
- ELISA
- CONCENTRAÇÃO DA PROTEÍNA
- Método do biureto
- Espectrofotometro na faixa do visível
- Método de Lowry
- Método de Bradford
- Método com prata
- ESTRUTURA SECUNDÁRIA
- Dicroísmo circular
- Luz UV
- Difração de raio-x
- Padrão-ouro para estrutura terciária
- Dicroísmo circular
- Bioensaio
- Análise de Contaminantes
- Microrganismos
- Partículas virais
- Substâncias patogênicas
- Partículas virais
- Microrganismos
- Eletroforese
- HPLC
- Espectrometria de massas
- Dicroísmo circular
- Mapeamento
- Produto acabado
UPSTREAM
- Seleção do microorganismo
- Microorganismo deve possuir condições necessárias
- Manutenção do Microorganismo
- Método de transferência periódica/repique
- Repique mantido em óleo mineral
- Repique mantido em água esterilizada
- Congelamento
- Liofilização
- Preparação do inóculo
- Seleção do Meio de Cultura
- Esterilização e Desinfecção
- Meios de Cultura, Ar e Equipamentos
- Processo continuo ou descontinuo
- Processo de Fermentação
- Biorreator
- Sistema de areação e/ou agitação
- Controlar
- Temperatura, Pressão, espuma, pH, agitação e aeração
- Controlar
- Sistema de areação e/ou agitação
- Biorreator
- Processo de Fermentação
- Esterilização e Desinfecção
- Seleção do Meio de Cultura
- Seleção do microorganismo
Engenharia genética
- Maioria dos biofármacos são proteínas em linhagens celulares recombinantes
- Insulina
- EPO
- Lisoenzima
- IL-2
- DNA Recombinante
- Habilidade de produzir a proteína codificada pelo gene
- Extração da proteína
- Separação por eletroforese
- Geração da sequência de AA
- Busca da função homóloga estrutural
- Reintrodução na célula
- Busca da função homóloga estrutural
- Geração da sequência de AA
- Separação por eletroforese
- Maioria dos biofármacos são proteínas em linhagens celulares recombinantes
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- Mind Map on Biotecnologia, created by Mapas Mentais on 16/06/2021.
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- Mapas Mentais
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