Processamento histológico

Processamento histológico

1. 5- Processamento

   • Desidratação - realizada de forma progressiva, a desidratação consiste em retirar agua da célula através da aplicação gradual de álcool em proporções 20x maiores do que a peça
   • É a preparação para que as peças sejam emblocadas, geralmente, em parafina e cortadas em fatias muito finas
   • Impregnação: são infiltradas substâncias firmes como a parafina e a resina para que seja possível realizar cortes finos das peças (blocos). Deve-se ter cuidado com a temperatura da substância para não alterar a peça
   • Diafanização ou clarificação - é a substituição do álcool anteriormente utilizado na desidratação, por um produto que a parafina tenha afinidade, como por exemplo o xilol, comumente utilizado.

2. 6- Inclusão

   • Órgãos tubulares devem ser incluídos no plano transversal e fragmentos de tecidos longos dever ser dispostos longitudinalmente
     • tais orientações podem variar de acordo com o objetivo da pesquisa e o que se deseja observar
   • Deve-se ter atenção a posição da peça visto que esta determinará a incidência do corte realizado
   • A parafina deverá envolver todo o exterior da peça, formando um bloco que será submetido a microtomia.

3. 7- Microtomia

   • Consiste, em utilizar um micrótomo para obter cortes sucessivos, delgados e uniformes, a partir dos blocos de parafina com as peças incluídas
   • O aparelho é formado por uma lâmina (fixa ou descartável) de aço, afiada e um braço ao qual se prende o bloco e que se desloca verticalmente
   • Há vários tipos de micrótomo, ex: criostato, micrótomo de congelação. Ultramicrótomo, tipo de serra e o vibratório
   • Fundamentais para a execução dos cortes são as navalhas, que podem ser de diversos tipos, de acordo com a especificidade do material a ser secionado quando à sua dureza

4. 8- Coloração e montagem

   • pode ser feita através de corante, de reações químicas especiais (histoquímica) ou de deposições metálicas
   • Os corantes coram os componentes teciduais (célula e matriz extracelular) de forma seletiva
     • São compostos orgânicos aromáticos, ionizáveis e, a princípio, incolores; e para que haja cor, é preciso que seja adicionado um cromóforo
     • de ação direta penetram ativamente no tecido
     • de ação indireta necessitam de um mordente, que é um elemento metálico que facilita a ligação do corante ao tecido por uma ligação covalente
   • pode ser progressiva, quando realizada gradualmente sem necessidade de remoção de excesso do corante (processo que se denomina diferenciação) ou regressiva, quando se hipercora o tecido e se procede a diferenciação para uma vizualização melhor dos elementos teciduais

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