Fixação de tecidos biológicos

Fixação de tecidos biológicos

1. Técnica histólogica mais importante

   • Estabiliza os componentes quimícos intra e extracelular
     • Conserva os elementos teciduais
     • Facilita a fixação
     • Interrompe o metabolismo celular

2. Existem 2 Tipos de fixação

   • Fisica- Temperatura
     • Pode influenciar na fixação: Ondas eletromagnéticas e agitação molecular
   • Química
     • Pode sofrer influência Física ambiental: Temperatura
     • Reage em sítios de biomoléculas
     • Estabiliza e impede a alteração tecidual

3. Os fixadores são divididos em 2 classes

   • Fixadores coagulantes
     • Não se ligam a proteinas
   • Fixadores não coagulantes
     • Ligam-se a proteina, precipitando-se

4. Classificação dos fixadores

   • Farmaldeído
     • Glutaraldeído
       • Paraformaldeído

5. Fatores que influenciam no processo de fixação

   • Temperatura
     • Espessura do tecido
       • Penetração
         • PH do fixador
     • Tempo de fixação
       • Escolha do fixador
         • Concentração do fixador
     • Estocagem apropriada
       • Osmolaridade da solução fixadora

6. Clivagem

   • Reduz as dimensões do fragmento
   • Facilita a penetração dos fixadores
   • Faz a difusão dos reagentes durante o processamento dos tecidos

7. Regras durante a coleta, fixação e a clivagem

   • Fixar o tecido após a coleta
     • Retira os órgãos com alto metabolismo
       • Nunca usar pinça no material
         • Remover a capsula para melhor fixação
           • Fragmentos de no minimo 3mm de espessura
             • Órgãos compactos colocar sobre uma placa de Petri revista de parafina
               • Faz clivagem com gielte para o fragmento ficar liso
                 • Agitar os fragmentos durante a fixação
                   • Frascos de bola larga facilitam o acesso do fragmento
                     • Nunca coloque um material fixado em um fraco vazio, ele pode grudar
                     • Acondicionar os tecidos clivadors em cassetes histológicos identificados

8. Biópsias

   • A amostra deve ser fixada em formol a 10% tamponado
   • O volume de formal para o tecido é de 10 volume de formol
   • O recipiente deve ter no minimo 10 vezes o volume de formal para o tecido
   • Amostras inadequadas é divido a quantidade insuficiente de formal
   • Pele
     • Um fragmento em formol em solução Mitchel para imunofloreceênca
   • Testículo
     • Fixado em solução Bouin / ir na mesma hora para o laboratório
   • Endométrio
     • Não usa gases porque a gaze retém parte do endométrio
   • Glânglios linfáticos
     • enviar a fresco, no caso de duvida colocar no formol