Generalidades de la producion de embriones bovinos en vitro

Generalidades de la producion de embriones bovinos en vitro

1. Historia: en 1920 ensayos en conejos, primer nacimiento en 1950 Bovinos: en la Década de los 70, primer nacimiento principio de los años 80.

2. Es una biotecnologia reproductiva mejoramiento genetico

   • Por la cual se obtienen Embriones en laboratorio, que pueden ser implantados en Útero de la hembra bovina
     • La colecta de oocitos puede ser por: Aspiracion floicular por ultrasonido, Laparoscopia via flanco Laparotomia ventral o medial
     • tiene diferentes fases:
       • Sistemas de cultivo celular
         • Medios indefinidos
           • Contiene suero fetal bovino: Que proporciona nutrientes a los embriones
             • El problemas mas frecuente al utilizar suero fetal bovino. los embriones sufren alteraciones ultra estructurales , Síndrome de ternero grande
           • Co cultivos con celulas somaticas, que contribuyen al desarrollo embrionario al remover sustancias nocivas
         • Medios semidefinidos
           • son medios donde no hay co-cultivos y el Suero Fetal Bovino es remplazado con albúmina sérica bovina
             • La albúmina es una de las proteínas con mayor presencia en el tracto reproductivo de los mamíferos y se cree que tiene un importante papel en la nutrición del embrión
         • Medios definidos
           • Son sistemas libres de proteínas, donde la Albumina Sérica Bovina es remplazada por macromoléculas como el polivinil alcohol y polivinilpirrolidona
             • Uso comercial limitado, en investigacion
       • Maduración de oocitos in vitro
         • Las características microscópicas del folículo son importantes para determinar el potencial de maduración nuclear y citoplasmática del oocito
           • Clasificaciones morfologicas
             • Calidad 1: cumulus compacto presente, conteniendo más de tres capas de células
             • Calidad 2: cumulus compacto parcialmente presente con menos de 3 capas de células
             • Calidad 3: cumulus presente, pero expandido. Citoplasma contraído con espacio entre la membrana
             • Calidad 4: oocito desnudo sin células del cumulus
       • Capacitación espermática
         • Este proceso ocurre en el tracto genital de la hembra por la remoción de los factores decapacitantes debido a las interacciones que se establecen entre el espermatozoide y los factores capacitantes
       • Preaparacion espermatica para la FIV
         • las técnicas mas utilizada en Separación de espermatozoides son
           • swin up: os espermatozoides vivos son separados de los muertos, del plasma seminal y de los componentes diluyentes, por la motilidad ascendente
           • Gradientes de percoll: el semen se centrifuga, pasándolo por diferentes gradientes de concentración, para permitir la separación de los espermatozoides vivos de los demás constituyentes del semen, basándose en la diferencia de densidades
           • Lavado expermatico
       • Fertilización in vitro de oocitos (FIV)
         • se debe proporcionar un ambiente apto para que ocurra la capacitación espermática y la fecundación
           • el medio más utilizado es el FERT, que contiene heparina para la capacitación espermática.
             • El co-cultivo (espermatozoides-oocitos) es realizado por un período ente 18 y 22 horas, a una temperatura de 39ºC, en una atmósfera de 5% de CO2
       • Cultivo de embriones in vitro (CIV)
         • los oocitos fertilizados son sometidos a la etapa de cultivo. El objetivo de esta etapa es permitir que, los oocitos fertilizados se desarrollen hasta un estadio embrionario en el que se pueda realizar la transferencia a la receptora.