Reaccion en Cadena de la Polimerasa

Reaccion en Cadena de la Polimerasa

1. es un metodo enzimatico que permite la sintesis in vitro de multiples copias de una secuencia determinada de ADN

   • se realizaran un ejemplo del ADN de Diana

2. Los Componentes son:

   • Ejemplo de la composicion de una Mescla de Reaccion

3. La Desnaturalizacion: es la separacion inicial de la doble helice del ADN en dos cadenas sencillas

   • se eleva la temperatura de 4 c a 95 c en 2 minutos
     • Se mantiene la temperatura durante 30 seg mas y sucede la Desnaturalizacion (ciclo 01)
       • A los 3 min del ADN de Diana se unen las primeras Primers. La temperatura varia en funcion de la composicion de bases de los Primer (50-60 C)
         • Ciclo 1 - Annealing
         • La Taq ADN polimerasa sintetiza la cadena complementaria a partir del primer. Este primer ciclo sobrepasa los limites de la secuencia Diana.
           • Ciclo 1 - Extencion
             • Desnaturalizacion
               • (ciclo 02)
               • Annealing
                 • (Ciclo 2)
                 • Extencion
                   • (Ciclo 2)
                   • Desentalizacion
                     • (Ciclo 3)
                     • Annealing
                       • (Ciclo 3)
                       • Extension
                         • (Ciclo 3)
                         • 2 ADN Diana
                           • (Ciclo 3)
                           • Desnaturalizacion
                             • (Ciclo 4)
                             • Annealing
                               • (Ciclo 4)
                               • Extension
                                 • (Ciclo 4)
                                 • 8 ADN Diana

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