Técnicas Histológicas

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Técnicas Histológicas
  1. Coleta de material
    1. Fixação
      1. impede a autólise dos tecidos, preservar sua estrutura molecular e composição
        1. pode ser feita com formaldeído 4% ou glutaraldeído
          1. na fixação por PERFUSÃO o agente fixador é gotejado no ventrículo para atingir toda circulação
            1. Processamento
              1. Desidratação - banhos de álcool com aumento gradativo de concentração (70, 80,100 %). Serve para remover a água
                1. Diafanização/ Clarificação - o álcool (que não é miscível em parafina) é removido com xilol. O material torna-se translúcido e permeável
                  1. Inclusão
                    1. O material é colocado em uma forma e impregnado com dois banhos de parafina 60º para que ela penetre por completo no tecido
                      1. O xilol é evaporado com a temperatura da parafina e quando ela endurece coloca-se uma superfície especial resistente ao corte e que protege para clivagem
                        1. forma-se o BLOCO HISTOLÓGICO
                      2. Microtomia
                        1. permite o corte do tecido em manchas delgadas
                          1. Coloração
                            1. Processo que evidencia estruturas teciduais
                              1. Afinidade tintorial
                                1. Corante catiônico + (básicos) SUBSTRATO ANIÔNICO
                                  1. Hematoxilina e azul de metileno; cora ácidos nucleicos, GAG's, glicoporteínas ácidas
                                  2. Corante aniônico - (ácido) SUBSTRATO CATIÔNICO
                                    1. Eosina; cora mitocôndrias, grânulos de secreção, colágeno
                                      1. Orceína - cora fibras elásticas
                                      2. Tricromico de Gomori: tecido conjuntivo frouxo (AZUL) núcleos (VERMELHO) ; fibras musculares, colágeno e núcleos
                                      3. O MORDENTE é muito importante para fixação da cor ser mais efetiva e não sair facilmente
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