Fichas
histologie: methode d'etudes B1-B9
Fichas del conjunto (200)
- 1comment appelle t on l'étude des tissus anormaux?anatomie pathologique
- 2le tissus comprend 2 constituants principaux qui sont ?cellules + MEC
- 3definition de la celluleunité fondamentale de la vie capable de subsister a d'état autonome et parfois de se reproduire
- 4les cellules différenciées sont des cellules ayant acquis 3 types de caractéristiques ….?1. caractéristique morphologique
2. caractéristique moléculaire
3. caractéristique fonctionnelle - 5ces cellules différenciées acquissent leurs caractéristiques morphologiques, moléculaires, et fonctionnelles en rapport avec quoi?en rapport avec un role physiologique spécifique
- 6les cellules en différenciations terminales = ?cellules différenciée et incapable de se diviser
- 7eg des cellules en différenciation terminalesglobule rouge, neurone, cellule épithéliale caliciforme, etc
- 8cellules indifférenciées=?cellule dont les caractéristiques morphologiques, moléculaires et/ou fonctionnelles ne permettent pas de prédire de fonction spécifique
- 9eg de cellule indifférenciéecellule souche
- 10organe =?entité anatomique macroscopique comportant plusieurs variétés de tissus
- 11viscère=?organe logé dans une des cavités (thorax, abdomen) de l'organisme
- 12eg de viscères creuxCoeur, estomac, intestin, …..
- 13eg de viscères pleinsfoie, rate, ….
- 14système =?ensemble de tissus et/ou d'organe définissant des connexions anatomiques, hormonales, ou fonctionnelles
- 15eg de systèmeSNC, système digestif, système endocrinien diffus, système immunitaire
- 16la limite de resolution de l'oeil nu?0,2 mm
- 17la taille des majorités des cellules se trouvent entre quels nombres0,2 mm a 1 microm
- 18limite de resolution du MO0,2 microm
- 19la taille des majorités des organites cellulaires est entre quels nombres?1 microm a 0,1 nm
- 20limite de resolution au ME0,2 nm
- 21Donnez 3 façons de prélèvements de cellules?1. par frottis
2. par brossage
3. par ponction - 22donnez 3 façons de prélèvements de tissus1. par biopsie
2. par endoscopie
3. par chirurgie - 23expliquez le terme d'un prélèvement par exérèseablation totale ou partielle d'un organe
- 24expliquez le terme d'un prélèvement par biopsieprélèvement d'un petit fragment d'organe pour analyse
- 25Question TextAnswer Text
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- 36Question TextAnswer Text
- 373 roles du fixateur1. immobilise les constituants tissulaires/cellulaires et les rend stable
2. previent la decomposition post mortem
3. permet la technique histologique et les colorations ulterieurs - 38le mecanisme d'action de la fixation peut comporter quoi?precipitation, polymerisation, coagulation de proteins, sucres ou lipides
- 39Question TextAnswer Text
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- 41Question TextAnswer Text
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- 43Question TextAnswer Text
- 44Question TextAnswer Text
- 45Question TextAnswer Text
- 46inconvenience du AFAAAN fragmentés
- 47pour choisir quel fixateur utiliser il faut balancer les avantages et inconveniences par apport a quoi?1. morphologie
2. immunohistochimie
3. etudes moleculaires (ADN/ARN) - 48Question TextAnswer Text
- 49Question TextAnswer Text
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- 56Question TextAnswer Text
- 57quels sont les étapes a suivre après fixation pour preparer le tissus pour une etude histologiques1. decalcification si prélèvement calcifié
2. inclusion
3. coupe
4. coloration
5. observation - interpretation - 58pourquoi on decalcifie?pour permettre ulterieurement la coupe
- 591. principe de la decalcification ? 2. elle peut être accélérer comment?1. tampon chélateur du Ca2+ type EDTA
2. la chaleur, l'electrolyse - 60quel est le but de l'inclusion ?donner la piece une consistance ferme et pour permettre la coupe
- 61quel est le milieu d'inclusion utiliser et fond a quel temp?PARAFFINE fond a 56c
- 62quels sont les 3 étapes de l'inclusion?1. automates
2. enrobage
3. refroidissement et demoulage - 63quels sont les 3 étapes de l'automates1. DESHYDRATATION
bains d'alcools successifs pour éliminer le fixateur
2. CLARIFICATION
bains de toluene ou de xylene pour éliminer l'éthanol
3. IMPREGNATION
bains de paraffine liquide(57c) pour impregnation du tissus par la paraffine - 64l'enrobage est un étape manuelle ou automatique? on fait quoi dans cette étapeun étape manuelle.
on met le paraffin liquide dans un cupule métallique + la piece d'intérêt - 65quel appareil est utilisé pour couper ?un microtome
- 661 tour du manivelle nous donne 1 coupe d'épaisseur?3 a 5 micro
- 67après la coupe après le microtome quel sont les étapes suivant?1.etalement dans bain marie a 37c
2.recuperation sur lame de verre
3.sechage sur platine chauffante - 68est ce que les tissus ont une coloration naturelle?non sauf des pigments tels que la mélanine, hémosidérine (fer), lipofuscines et des pigments exogènes comme les tatouages
- 69quels sont les étapes de la coloration1. déparaffinage
2. re-hydratation
3. colorants
4. de-hydratation
5. montage - 70principe du déparaffinagebains de toluene ou xylene
- 71re-hydratation?bains d'alcool de moins en moins concentré
- 72l'étape de colorantsex: HES
1. bain d'hématéine
2. eau
3. bain d'éosine
4. eau
5. bain de safran
6. eau - 73l'étape de de-hydratationbains d'alcool de plus en plus concentrer
- 74l'étape de montagelamelle horizontale, temp ambiante, colle
- 75grossissement du MO ?entre x2 et x1500
- 76en MO est ce que l'identification est possible pour 1. c. eukaryotes? 2. noyaux? 3. mitochondries? 4. bactéries? 5. elements de la MEC1. oui
2. oui
3. non
4. certaines apres coloration
5. certains apres coloration - 77chaque elements de la coloration standard HES se fixe sur quoi?1. hemateine: basique: AN
2. eosine: acidique: proteines
3. safran: collagene
- 78quels sont les étapes a suivre pour preparer un tissus congelé pour une etude histologique1. coupes de tissus congelé a -80c ou inf.
2. réchauffement a -20 a -30c et enrobage dans colle OCT
3. coupe au cryostat a -20 a -30c
4. séchage
5. fixation (ethanol ou acetone)
6. coloration (HE)
7. montage - 79pq la congelation aide au diagnostic pour un examen extemporané?urgence du resultant nécessité par le chirurgien
- 80comment la congelation est meilleur pour le diagnostic comparer au tissus directement fixé?.permet:
-recherche d'accumulation lipidiques
-histochimie
-immunohistochimie
-extraction d'ARN et d'ADN. - 81pq congeler et archiver des échantillons congelés?1. a visée sanitaire
2. pour interface avec recherche - 82cytospin?conc. de liquide peu cellulaire
- 83pour une apposition et cytologie, quels sont les fixateurs rapides utiliser?ethanol
methanol
acetone
laque - 84l'inclusion est il necessaire?NON mais possibilite de realiser un culot cellulaire pour liquide puis d'inclusion du culot en paraffine
- 85la congelation est elle possible?oui
- 86pour la coloration, des bains de toluene ou de xylene sont il pre recquis?non
- 87quels sont les autres procedures applicable sur une apposition pour une etude cytologique?1. coloration speciales
2. techniques histo-enzymatiques (avant fixation)
3. immunocytochimie
4. FISH sur noyaux interphasiques - 88pour une cytologie vaginale quel coloration est utiliser?coloration de papanicolaou
- 89pour une cytologie vaginale quel est la couleur du : 1. noyaux 2. cytoplasme des c. profondes 3. cytoplasme des c. superficielles1. bleu
2. bleu
3. rose
- 90chez une femme ménopausée on voit quoi sur une cytologie vaginale?l'absence de cellules superficielles
- 91la coloration MGGhematologie
- 92comment peut on prelever des cellules pour une hematologie?1. frottis sanguin
2. aspiration et apposition de la moelle
3. ponction de liquide inflammatoire
4. coupe d'organes lymphoides ou hematologique (BOM) - 93coloration MGG donne quel couleur pour cellule : 1. basophile 2. eosinophile 3. neutrophile 4. azurophile1. bleu
2. orange
3. beige-rose
4. pourpre
- 94la coloration bleu de cresyl permet elle une cytologie vitale ?oui (avant fixation)
- 95Bleu de cresyl est utiliser pour identifier quel sorte de cellule?les reticulocytes dans le sang
- 96comment la microscopie a contraste de phase est differente?en revelant les differences de phase de lumiere apres sa traverser de l'echantillon: differences d'indice de refraction
- 97c'est quoi l'interet de ce microscope?etude de cellules vivantes (non fixées) sur boite de culture ou lames
- 98quels sont les applications cliniques?1. recherche d'anomalies de la mobilite ciliaire
2. tests de mobilite des spermatozoides - 99application recherche?etudes de la mobilite des cellules
- 100grossissement du MET ?x500 a x200 000
- 101on peut identifier quoi comparer au MO?organites, systemes de jonctions, myeline, elements de la MEC
- 102quels sont les etapes d'une preparation pour etudes en MET?1. fixation
2. inclusion
3. coupe
4. coloration (optionelle pour contraste) - 103l'incovenience du MET1. cellule mort
2. seule une tres petite surface peut etre etudier - 104les etapes de la fixation ?immersion dans fixateurs:
1. glutaraldehyde (plusieurs bains, 1h total)
2. puis tetroxide d'osmium (acide osmique) - 105inclusion?resine epoxy
- 106pour une etude avec un MO quel est la facon de proceder?1. coupes semi fines de 1micro des blocs de resine avec une ultramicrotome dont le rasoir est une lame de verre
2. la coloration utiliser est le bleu de toluidine
3. puis montage sur lame de verre
4. verification du materiel
5. reperage/selection - 107—coloration bleu de toluidine
-verification du materiel
-reperage
- 108l'utra microtome utilie quoi comme rasoir pour une etude cytologique en MET?diamant
- 109les coupes ultra fines mesurent combien?50nm-0,5micro
- 110recuperation se fait sur quoi?la grille
- 111pour du contraste qui est optionelle on utilise quoi comme coloration?sels de plomb et d'uranium
- 112acide osmique se fixe sur des substances osmiophiles pour contraste. Donnez eglipides insaturés
la myéline - 113le MET est utiliser pour etudier des?coupes
- 114le MEB est utiliser pour étudier ?des reliefs de surface
- 115le MEB apres cryofracturedes reliefs et jonctions cellulaires
- 116les colorations simples peuvent etre appliquer sur ?-coupe paraffine
-coupe congelation
-lame de cytologie - 117contre une coloration IHC, on peut utiliser l'hématéine seule pour ?une morphologie globale
image
- 118MGG?hematologie
- 119trichrome de masson pour ?mise en evidence du tissus conjonctif (collagene de type 1 en vert)
- 120pour identifier des fibres elastiques on peut utiliser quoi comme coloration?orceine
- 121utilisation du bleu de toluidine?-pour une morphologie globale
-coloration bleu pour reperage avant ME avec des coupes semi-fines - 122a cause d'une métachromasie qu'est ce qui se passe au bleu de toluidine?transformation du bleu au rouge en presence de mastocytes et polynucléaires basophiles
- 123pour identifier certaines cellules endocrines quels sont les métaux lourds qu'on peut s'en servir?l'argent (grimelius, fontana)
sels de chrome
- 124pour coloration de la reticuline et neurones et prolongements neuronaux quels sont les métaux lourds qu'on peut servir? (image=reticuline)l'or
l'argent
(image =prolongements neuronaux)
- 125les colorations pour mettre en evidence le RERbleu de methylene
méthode de Nissl
violet crésyl
(application: neurohistologie)
- 126qu'est qui ne peut pas être étudier sur coloration HESles polysaccharides et mucines
- 127du coup on utilise quoi comme colorant?PAS
PAS diastase - 128grace a la rxn de Schiff a l'acide periodique (PAS)on a une couleur pourpre/magenta pour ?-mucines
-glycogène
-lame basale
-glycosaminoglycanes
-protéoglycanes
- 129quel est l'action du PAS et PAS diastase sur une coupe?Une action de l'amylase va permettre d'identifier du glycogène sur coupe consecutives avec PAS+ mais PAS diastase-
- 130bleu de alcian peut être utiliser pour ?-certaines mucines (acides)
-certaines glycosaminoglycanes (cartilage)
- 131pour la detection de l'accumulation de certaines substances on utilise des colorants spéciales. Donnez des eg-coloration de Perls pour la detection du fer (image hémochromatose)
- autres colorations : cuivre (maladie de Wilson)
calcium (methode de von kossa)
pigments billiaires
- 132il y a des colorations spéciales pour la detection d'agents infectieux. donnez des eg pour detection des bactéries et champignonsbactéries:
- coloration GRAM
-coloration Ziehl
-coloration de Whartin-starry
champignons:
-coloration de Grocott
- 133pour mettre en evidence des inclusions lipidiques faut colorer comment ?par diffusion d'huiles
- 134donnez des egSoudan IV - rouge
O red oil - rouge
Noir Soudan - 135pq on peut utiliser ces colorants uniquement a partir de tissus/cellules frais ou congelés?car les inclusions lipidiques disparaissent après traitement par le toluene
- 136pour mettre en evidence une activite enzymatique intreseque on peut le faire uniquement a partir de …?de tissus frais ou congeler
- 137quels est l'application des enzymes suivants? 1. tyrosinase (dopa rxn)1. melanocytes
- 1382. phosphatase acidelysosomes
- 1393. peroxydase et esterasetypage leucocytaires
- 1404. succinate deshydrogenase4. typage fibres
- 1415. ATPase5. application musculaires squelettiques
- 142pour un typage des hemopathies sur frottis sanguin, je peux appliquer quels 2 sortes d'enzyme1. peroxydase
2. esterase - 143identifier l'imageperoxydase: lignee granuleuse
- 144identifier l'imageesterase monocytaires
- 145pour typage de rhabdomyocytes on peut utiliser quels sortes d'enzymes?
- 146pour une technique histoenzymatique on peut appliquer en recherche les enzymes comme traceur de population cellulaire. Donnez un eg
- 147quel est l'interet de l'immunohistochimie et immunocytochimie?reperer des antigenes (proteins le plus souvent) d'interet au niveau cellulaire ou extracellulaire a l'aide d'anticorps specifiques
- 148antigene?molecule capable d'activer le systeme immunitaire et de conduire a la production d'anticorps
- 149anticorps?glycoproteine secrete par les plasmocytes capable de se lier specifiquement a l'antigene
- 150epitope?site de l'antigene où se fixe l'anticorps
- 151antigene - anticorps
- 152principes IHC1. exploiter la reponse immunitaire de diverses especes pour produire des Ac specifiques
2. realiser la liaison Ag-Ac 'in vitro'
3. detecter (visualiser) le complexe Ag-Ac - 153un Ag possede en general combien d'epitopes?plusieurs
- 154En fonction de la configuration de l'Ag, un epitope peut ne pas etre accessible a l'Ac. Vrai ou fauxvrai
- 155est ce que plusieurs Ac peuvent se lier a un meme epitope avec une meme affinite?non avec des affinites differentes
- 156un meme epitope peut il se trouver sur de diff ag?oui
- 157quels sont les difficultes de l'IHCdisposer d'un bon Ac specifiques
et
pouvant atteindre son epitope sur coupe - 1582 types d'Ac utiliser pour IHC1. Ac polyclonaux
2. Ac monoclonaux - 159LES AC POLYCLONAUX: 1. la generation de ce dernier se fait comment?1. par immunisation avec des injections successives par eg a un lapin jusqu'a sacrifice pour collecter le serum
- 160le serum contient quoi?contient un cocktail d'Ac diff
dirigees contre diff epitopes
avec des affinites diff. - 1612. avantages?simple
peu couteux - 1623. Inconvenients?1. risque de rxn croisees (signal non specifique)
2. qtte limites de serum
3. reproductibilite non garantie (heterogenite des lots) - 163LES AC MONOCLONAUX 1. generation IN VIVO ?IN VIVO- immunisation successives par eg a un souris jusqua sacrifice pour extraire la rate et les ganglions dont on obtien multiples PLASMOCYTES diff
- 1641. generation IN VITRO?1. immortalisation des plasmocytes en fusionant avec des cellules tumorales pour donner des HYBRIDOMAS
2. dilution limite (1 cellule par puit)
3. culture cellulaire
4. tests des surnageants (Ac) et selection des clones d'interets
5. production a grande echelle
6. cryopreservation des clones - 1652. Avantages?un seul Ac par clone (limite les rxn croisees)
qtte illimitees et homogene - 1663. inconvenients?long, couteux, resultat incertain
souvent donne des signaux plus faibles que les polyclonaux - 167IHC ET ICC l'acces de l'Ac a l'Ag depend de 3 facteurs1. type de prelevement tissulaire/cellule
2. localisation de l'Ag (mbranaire/intracellulaire)
3. nature de la fixation - 168l'acces de l'Ac a l'Ag est comment pour 1.une coupe en congelation ?-situation souvent le plus simple
-pas de pb liees a la localisation de l'Ag
-differentes post-fixations possible - 1692. une cellule-situation intermediaire
-permeabilization membranaire si l'Ag est intracellulaire - 1703. du tissus fixees et inclus en paraffine-situation parfois difficile
-fixation definitive
-technique de demasquage antigenique - 171demasquage antigenique?anticorps reconnaissant l'epitope mais l'epitope est inaccessible
- 172eg de technique pour le demasquage antigenique-digestion partielle a la trypsine
-chaleur : modification conformationelle
-digestion partielle + chaleur - 173etapes d'une IHC directe1. incubation Ac primaire couplee a un traceur
2. lavages
3. lecture - 174en IHC directe le traceur est un ?? donnez un eg-un fluorochrome
-isothiocyanate de fluoresceine - 175la lecture se fait commentdirecte sous l'UV avec un microscope a fluorescence
- 176avantages du immunofluorescence- simplicte
-sensibilite
-double marquage
-IF directe (cytometrie) ou indirecte
-peu de bruit de fond
-proportionalite (quantification) - 177inconvenient de l'IFfond noir
- 178la microscopie a fluorescence marche comment?-systeme d'excitation UV via lampe a mercure
-fluorochrome (marquage de la preparation)
-systeme de detection : oeil, camera - 179interets de ce microscope-etude de cellules fixees (ICC, IHC, HIS)
-etudes de fluorescence sur cellules vivantes - 180la microscopie marche comment?-forme de microscope a fluorescence
-platine motorisee
-avec traitement bio-informatique, reconstruction en 3D possible (X,Y,Z) - 181quel est le principe general pour une IHC en ME ou ImmunoGold1. incubation Ac primaire
2. lavages
3. incubation PROTEINE A-OR COLLOIDAL
4. lavages
5. lecture - 182les particules d'or en ME sont visibles entre quel diameter?entre 1 a 20 nm de diametre
- 183example de ME ImmunoGoldparticule d'or
- 184etapes du IHC en plusieurs couches1. incubation Ac primaire
2. lavages
3. incubation Ac secondaire marquee
4. lavages
5. lecture - 185si on utilise le fluorochrome comme traceur, la lecture se fait comment?directe sous l'UV (microscope a fluorescence)
- 186mais le plus souvent on utilise un enzyme comme traceur qui permet une rxn coloree de quel type?de type peroxydase ou phosphatase
- 187pour eg si on utilise du peroxydase comme traceur on a quoi apres une rxn avec du substrat chromogene (DAB) + H2O2?ppt brun insoluble
- 188le principe d'amplification par complexe avidine-biotine a quoi comme but?augmenter la detection d'un signal de faible intensite
- 189les etapes a suivre pour une amplification avidine-biotine
- 190anticytokeratines ?-marqueur des cellules epitheliales
- ectoblastique+++
- endoblastique+++
- mesoblastique+++ - 191antivimentine?-marqueurs des c. d'origines mesoblasique
(non epitheliale, epitheliale, musculaire) - 192antidesmine?marqueurs des cellules musculaires
- 193antiproteine acide fibrillaire gliale ou anti GAFP?-marqueurs de certaines cellules gliales
(asctrocytes, ependymocytes) du SNC - 194anti-Ki67?cellules en cycles (sauf en G0)
- 195anti chromogranine?Ag associee a la presence de vesicule endocrines
- 196anti alpha actine musculaire lisses-c. musculaires lisses
-myofibroblastes
-c. myoepitheliales - 197anti synaptophysines?certains neurones
- 198l'immunocytochimie peut etre il realiser en phase liquide?oui
(cellule sanguine, cellule en suspension) - 199peut etre il analyser par systeme automatisees?oui
(cytometrie en flux) - 200donnees quantitatives possible?oui par les % de cellules marquees
Información
- Descripción
- histologie Fichas sobre histologie: methode d'etudes B1-B9, creado por faizia basharat el 01/08/2018.
- Creado por
- faizia basharat
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