Cuantificación directa de proteína

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Cuantificación directa de proteína
  1. Método de Biuret
    1. Es un ensayo colorimétrico
      1. Se cuantifica la formación de un complejo estable entre proteínas y cobre (II).
        1. Tiene dos máximos a 330nm y a 545 nm.
        2. Cumple la ley de Beer-Lambert
        3. Método de Lowry
          1. Combina la reacción de Biuret con la reducción del reactivo de Folin- Ciocalteu
            1. Es útil para determinar pequeñas cantidades de proteína
              1. Afectado por la presencia de azúcares reductores
                1. Absorbancia, entre 500 y 700 nm.
                2. Método del BCA
                  1. Permite la determinación colorimétrica de la proteína total.
                    1. Combina la reducción del Cu2+ a Cu+ por las proteínas en un medio alcalino
                      1. Coloración púrpura, con un máximo de absorción a 562 nm
                      2. Método de Bradford
                        1. La unión de las proteínas al colorante azul brillante de Coomassie G-250
                          1. provoca un desplazamiento del máximo de absorción, desde 465 nm a 595 nm.
                          2. La luz dispersada por las partículas en suspensión puede medirse por dos técnicas
                            1. La turbidimetría
                              1. La nefelometría.
                            2. Determinación de albúmina
                              1. Un cambio en la absorbancia del verde de bromocresol, de absorción 440nm pasa a su máximo a 630 nm.
                              2. Sprint
                                1. Basado en un rápido proceso de química verde permite la detección directa de proteínas
                                2. Determinación de hemoglobina
                                  1. Cianohemoglobina, presenta un máximo de absorción a 540 nm.
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