MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN

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MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN
  1. CELULAR
    1. Fragmentación Celular
      1. Obtención de un determinado componente celular mediante un conjunto de diversos métodos y técnicas Se puede observar: orgánulos, fracciónes de membrana, complejos multiproteicos (citoesqueleto de actina, microtúbulos, poros nucleares, etc.) * Método más común de separación
        1. Centrifugación Diferencial
          1. Diferencial de densidad entre la partícula a sedimentar y la densidad del medio en el que se encuentra Sedimentación - Es el transporte de partículas en un campo de fuerza de centrifugación
            1. Centrifugación zonal
              1. la muestra a analizar se deposita en la parte superior de un gradiente de densidades previamente formado
                1. Ultracentrifugación
    2. BACTERIANA
      1. Métodos fenotípicos
        1. Los esquemas tradicionales de identificación fenotípica bacteriana se basan en las características «observables» de las bacterias, como su morfología, desarrollo, y propiedades bioquímicas y metabólicas.
          1. Dentro de esta batería de pruebas bioquímicas se destacarían las:
            1. Características macroscópicas: morfología y hemólisis; Cultivo: Medios de cultivo y requisitos de crecimiento en relación a atmósfera, temperatura y nutrición.
              1. Pruebas bioquímicas, diferenciando
                1. 1) Pruebas que se utilizan en la identificación preliminar y con lectura inmediata como la catalasa y oxidasa
                  1. 2) otras pruebas rápidas, con lectura en menos de 6h tal y como la hidrólisis del hipurato, la β-galactosidasa (ONPG), las aminopeptidasas, la uresa y el indol
                    1. 3) pruebas lentas, con lectura de 18 a 48h que incluirían la óxido-fermentación, reducción de nitratos, rojo de metilo, Voges-Proskauer, Agar hierro de Kligler, fermentación de azúcares, hidrólisis de la esculina, coagulasa, fenilalanina-desaminasa, DNasa, hidrólisis de la gelatina, decarboxilasas, lipasa, lecitinasa, utilización de citratos, utilización de malonato, y prueba de CAMP entre las más frecuentes
          2. Métodos moleculares
            1. La ausencia de concordancia entre las características observables, morfológicas y/o fenotípicas del aislamiento en estudio y las correspondientes a la(s) cepa(s) de la especie tipo, hacen que los métodos fenotípicos realizen la identificación más probable y no definitiva.
              1. El ARNr 16S (rrs)
                1. 16S-23S ARNr
                  1. ARNr 23S
                    1. subunidad β de la ARN polimerasa,subunidad ß de la ADN girasa
        2. PARASITARIA
          1. Método directo
            1. Observación del agente etiológico
            2. Método indirecto
              1. detección indirecta del parasito
              2. Método de Strout para diagnosticar la enfermedad de Chagas Biopsias
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