Métodos y Técnicas utilizadas en el estudio de la Célula

Alexandy Castro
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Métodos y Técnicas utilizadas en el estudio de la Célula
1 Estudio Fisicoquímico
1.1 aislamiento, localización e identificación de componentes de la celula
1.1.1 CENTRIFUGACIÓN
1.1.1.1 Separación de mezcla sometiéndola a elevadas aceleraciones
1.1.2 CROMATOGRAFÍA
1.1.2.1 Separación de mezcla por sus diferencias de absorción
1.1.2.2 se basa en las fuerzas de Van der Wals
1.1.3 CULTIVOS "IN VITRO"
1.1.3.1 mantienen líneas celulares en el exterior de un organismo
1.1.4 ELECTROFORESIS
1.1.4.1 las sustancias se desplazan en función de su carga eléctrica
1.1.5 FLUORESCENCIA
1.1.5.1 Emite radiaciones uv que atraviesan la molécula
1.1.5.2 Se usa con moléculas fluorescentes naturales
1.1.6 FRACCIONAMIENTO CELULAR
1.1.6.1 obtiene fracciones puras de un componente celular
1.1.6.2 Proceso
1.1.6.2.1 Rotura de células o tejido
1.1.6.2.2 Separación de la fracción por centrifugación
1.1.7 CITOQUÍMICA
1.1.7.1 estudia la composición química de la célula
1.1.7.2 detecta localización topográfica de:
1.1.7.2.1 principios inmediatos
1.1.7.2.2 enzimas
1.1.7.2.3 metales pesados
1.1.7.2.4 otras sustancias
1.1.7.3 mediante reacciones coloreadas, enzimáticas o de inmunofluorescencia,se investiga:
1.1.7.3.1 composición bioquímica de estructuras celulares
1.1.7.3.2 localización
1.1.7.3.3 funcionamiento
1.1.8 RADIOISÓTOPOS
1.1.8.1 Consiste en marcar la molécula cuyo destino interesa seguir
1.1.8.2 Proceso
1.1.8.2.1 unir un isótopo radiactivo
1.1.8.2.2 cultivar las células
1.1.8.2.3 detectar la radiación a intervalos
1.1.8.3 más usados en Biología celular
1.1.8.3.1 14C, 32p, 2H, 3H, 35S, 24Na
2 Estudio Morfológico
2.1 Observación directa de la estructura celular
2.1.1 MICROSCOPIA
2.1.1.1 óptica
2.1.1.1.1 Utiliza luz visible y lentes ópticas para aumentar la imágen.
2.1.1.2 Electrónica
2.1.1.2.1 utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible
2.1.1.2.2 De Transmisión (TEM)
2.1.1.2.2.1 se usa para observar estructura de virus y ultraestructura celular
2.1.1.2.3 De Barrido (SEM)
2.1.1.2.3.1 sustituye la luz por un haz de electrones y las lentes por electroimanes
2.1.2 CONTRASTE DE FASES
2.1.2.1 Usa el índice de refracción de la célula para crear una imagen de mayor contraste
2.1.3 CAMPO OSCURO
2.1.3.1 Dirige la luz a la preparación haciendo que la luz difractada pase al ocular.
2.1.3.2 La muestra aparece iluminada sobre un fondo oscuro.
2.1.4 BARRIDO CONFOCAL
2.1.4.1 Emplea iluminación con rayo láser
2.1.4.2 Toma imágenes en cortes muy finos