Flowchart
Diagrama PCR
Flowchart content
Reacción en cadena de la polimerasa convencional
Preparar
Una cantidad de la mezcla maestra suficiente para 6 muestras de ADN
Añadir
Los reactivos especiales para el experimento en el tubo de la mezcla maestra
Colocar
243 μl de agua destilada
Añadir
30 μl de la memoria intermedia de PCR 10X que contiene MgCl2
Utilizar
6 μl de los 10 Mm dNTPs
Agregar
6 μl de la impresión hacia adelante, 6 μl de la impresión en reversa y 3 μl de la Taq ADN polimerasa
Mezcla maestra
Añadir
49 μl de la mezcla maestra
Preparar
Muestra de ADN.
1 μl de cada muestra de ADN.
Colocar
Los eppendorf en el termociclador
Realizar
Una desnaturalización de inicialización a 94 grados centígrados durante 5 minutos por un ciclo.
Realizar
La desnaturalización, a 94 grados centígrados durante 30 segundos, la fase de recocido a 50-65 grados centígrados durante 30 segundos y el alargamiento a 72 grados centígrados durante un minuto por 30 ciclos.
Elongación
La elongación final a 72 grados centígrados durante 10 minutos para un ciclo
Realizar
Fijar
A cuatro grados centígrados por un tiempo indefinido durante un ciclo.