Deshidratación: reactivos ysustancias alternativas

Deshidratación: reactivos ysustancias alternativas

1. Durante la deshidratación rápida, el agua del tejido es reemplazada rápidamente, sin el daño por tensión superficial que puede ir asociado con los alcoholes o la acetona. El metil celosolve y dimetoxipropano tienen regiones hidrofílicas e hidrofóbicas. Esto permite que el solvente interactúe con los lípidos de las membranas biológicas, sin causar alteración

   • .La deshidratación resultante es vía un mecanismo de flujo en masa en vez de una reacción química. Estos solventes pueden hidrolizar el agua para formar etanol y acetna, sin embargo, la energía y condiciones requeridas para esta reacción no son normales en las condiciones de fijación y no son consistentes con la preservación de tejidos
     • . El más común es el reemplazamiento gradual de agua con un solvente orgánico por transferencia del tejido a través de soluciones de concentraciones crecientes (etanol, acetona)-referido como una serie de deshidratación graduada
       • La deshidratación resultante es vía un mecanismo de flujo en masa en vez de una reacción química. Estos solventes pueden hidrolizar el agua para formar etanol y acetna, sin embargo, la energía y condiciones requeridas para esta reacción no son normales en las condiciones de fijación y no son consistentes con la preservación de tejidos
     • Un método menos común en microscopía de campo claro es una deshidratación rápida utilizando un reactivo orgánico (metil celosolve, dimetoxipropano, trietil fosfato).
       • Durante la deshidratación rápida, el agua del tejido es reemplazada rápidamente, sin el daño por tensión superficial que puede ir asociado con los alcoholes o la acetona. El metil celosolve y dimetoxipropano tienen regiones hidrofílicas e hidrofóbicas. Esto permite que el solvente interactúe con los lípidos de las membranas biológicas, sin causar alteración
     • La mayoría de los solventes de deshidratación no son también solventes de parafina; por tanto incorporaremos varios pasos de intermediarios para mover el tejido del agente deshidratante hasta la parafina. Ejemplos de agentes intermedios son Histo-Clear, xileno, isopropanol, y tert-butil alcolhol (TBA).
       • El isopropanol es preferido cuando se usa la técnica de micro ondas. El huso de Histo-Clear extraerá un fino pegamento amarillo que atrapará y destruirá las muestras de tejidos. A 58ºC la extracción puede ocurrir dentro de una semana. Cuando infiltramos en plástico, no se requiere un solvente intermediario
         • Es importante tener presente que los pasos de la solución de deshidratación e infiltración son solventes orgánicos. Por tanto, cuando etiquetes las muestras de tejidos usa pequeñas etiquetas de papel escritos con lápiz y no con boli. Pon la etiqueta en el vial con la muestra de tejido. Los solventes orgánicos disolverán el pegamento que está sobre la etiqueta del vial y la tinta que usaste mara marcar la etiqueta.