ENZIMOLOGIA

Cultura Pura

Saccharomyces cerevisiae ATCC MYA-797 adquirido na forma liofilizada

Reativação

Frasco de Erlenmeyer de 50 mL contendo 10 mL de meio líquido YPD com pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 com TºC 26, 150 rpm por 45 horas

Crescimento

1 mL do cultivo transferido para frasco de Erlenmeyer de 50 mL contendo 10mL de meio YPD com pH 5,6. Agitador incubador NOVAMARCA nt 715 com TºC 26, 150 rpm por 20 horas

Conservação

Via técnica de Transferência Periódica ou técnica de Congelamento

Técnica de Congelamento

1 mL do cultivo transferido para Erlenmeyer de 50mL contendo 10 mL meio YPD pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 TºC 26, 150 rpm por 18 horas. 1 mL de cultivo transferido para frascos de polipropileno estéril. Centrífuga SIGMA 1-14 903 xg por 1 minuto. Descarte do sobrenadante e repetição do procedimento por 3 vezes. Adição de 800 µL de meio YPD pH 5,6 e 200 µL de glicerol. Freezer Consul TºC -18ºC

Técnica de Transferência Periódica

1 mL do cultivo transferido para um frasco de Erlenmeyer de 50mL contendo meio YPD pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 TºC 26, 150 rpm por 18 horas. Transferência do cultivo com alça descartável estéril para tubo contendo meio sólido YPD inclinado pH 5,6

Cultivo em laboratório

0,3 mL de suspensão 4,5x10^8 células/mL transferido para 8 frascos de Erlenmeyer de 50 mL com 10 mL de meio YPD pH 5,6. Agitador incubador NOVATECNICA nt 715 TºC 26, 150 rpm por: 0, 3, 5, 9, 12, 18, 24 e 30 horas.

Inóculo em laboratório

Fase log obtida em 20h em meio YPD pH 5,6 sob agitador e incubador a 150 rpm. 4,2x10^8 células totais/mL.

Cultivo industrial

Inóculo

Matérias-primas

Extrato de levedura 10g/L, Peptona 20g/L, Dextrose 20g/L

Matérias-primas

Cana-de-açúcar variedade RB-785148

Meio de cultivo

YPD pH 5,6 TºC 26

Esterilização

Autoclave com calor úmido sob pressão de 1 atm e temperatura de 121ºC por 15 minutos

FERMENTADOR

Metabolismo Aeróbio

Ar

Esterilização

Meio Fermentado

Produto

Levedura Saccharomyces cerevisiae ATCC MYA-797

Resíduos

Tratamento dos Resíduos

Subprodutos

Controles

Temperatura, pH, taxa de aeração, concentração do substrato, concentração do produto, oxigênio dissolvido, potência e velocidade do agitador, análise dos gases e controle de espuma

Meio de Fermentação

Mosto

Esterilização

Temperatura ​​​121ºC por 15 minutos