PROCESSAMENTO HISTOLÓGICO

PROCESSAMENTO HISTOLÓGICO

1. ETAPAS

   • 1º. COLETA DO MATERIAL
     • 2º. FIXAÇÃO
       • 3º. CLIVAGEM
         • 4º. DESCALCIFICAÇÃO
           • 5º. PROCESSAMENTO
             • a. Desidratação: utiliza-se álcool 70%, 80% ,90% até chegar ao álcool 100%
               • b. Diafanização ou Clarificação: utiliza-se o xilol para retirar o álcool e permitir a entrada da parafina
                 • c. Impregnação: utiliza-se parafina ou resina no interior da peça para torná-la firme
             • 6º. INCLUSÃO
               • 7º. MICROTOMIA
                 • 8º. COLORAÇÃO
                   • a. Desparafinização: como a parafina é lipossolúvel, e os corantes são hidrossolúveis, a desparafinização torna possível a interação do corante com as estruturas celulares.
                     • b. Hidratação: as lâminas são submetidas à hidratação em álcool em sequência decrescente de graduação para preparar o meio para receber os corantes solúveis em água.
                   • CORANTES
                     • Hematoxilina é um corante catiônico/básico e tem afinidade com estruturas ácidas (basófilas) nos tecidos, como o núcleo celular, colorindo-os de roxo.
                     • Eosina é um corante aniônico/ácido e tem afinidade com estruturas básicas (acidófilas) nos tecidos, como o citoplasma celular, colorindo-os de róseo-avermelhado.
                   • 9º. MONTAGEM
                     • Desidratação em série alcoólica crescente, clarificação em xilol e, por fim, com a selagem ou montagem da lâmina, que cobre o tecido corado com uma lamínula de vidro.
                 • Cortes finos da peça
               • Utiliza-se parafina no exterior da peça para formar um bloco
           • Alguns tecidos podem sofrer deposição de sais de cálcio, os quais são insolúveis e tornam rígida a consistência dos tecidos, o que impossibilita um corte fino viável e estraga o micrótomo
             • Descalcificação Física: dissociação eletrolítica, ultrassom e micro-ondas
             • Descalcificação Química: Soluções ácidas, soluções quelantes ou por troca iônica
         • Pode ocorrer antes da fixação, dependendo do tamanho da peça
           • Redução do tamanho das peças para facilitar a penetração do fixador em menor tempo
       • Fase destinada a interromper o processo de autólise, sendo o Formaldeído a substância mais comumente usada
         • Fixação por agentes físicos (frio e calor)
           • Fixação por agentes químicos (líquidos fixadores)

2. Artefatos: possíveis erros

   • Uma peça com sais de cálcio que não foi devidamente descalcificada pode quebrar a lâmina do micrótomo
   • Se houver dentes na lâmina do micrótomo, ou a pinça utilizada para pegar a peça não for adequada, haverá lesões no tecido que irão prejudicar sua estrutura
   • Se não houver a correta remoção da parafina, a peça ficará com manchas brancas, prejudicando a coloração e a visualização das estruturas

3. GRUPO: Andrise Lissa Preuss, Bárbara Primon Barfknecht, Bruna Manoella Garbin, Clara Yumi Hirota, Geison Eliziario

4. TURMA 86